組換えDNA法によるヒト型 腫瘍モノクロ-ナル抗体の作製と応用

重组DNA法人肿瘤单克隆抗体的制备及应用

• 批准号: 02152085
• 负责人: 渡邊 武
• 金额: $ 3.52万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02152085/
• 关键词: ヒト型モノクロ-ナル抗体; 抗腫瘍免疫; 組換えDNA法; PCR法

モノクロ-ナル抗体の作成には,通常ハイドリド-マ法が用いられるが,本研究ではハイブリド-マ法を用いず,組換えDNA法を用いて,ヒト型モノクロ-ナル抗体を作成し,それをガン診断および治療に応用することを試みる。我々はこれまでに免疫グロブリン遺伝子の発現制御を詳細に検討し,効率よく抗体遺伝子を発現させるエレメント(エンハンサ-)の同定と,その発現のためのベスタ-の構築を行ってきた。本年度に得られた成果は以上のごとくである。任意の腫瘍抗原に対するヒト型またはマウスーヒトキメラ型モノクロ-ナル抗体を組み換えDNA法を用いて,マウス骨髓腫細胞で発現産生させるための発現ベクタ-の構築とV領域遺伝子増巾のためのプライマ-の作製を行った。再構成を終えたV遺伝子を出来る限り多くPCR法で増巾し得るようにプライマ-の設計を行った。ヒトリンパ球およびハイブリド-マ細胞を用いた予備実験ではいずれの場合も正しいV遺伝子群が増巾されクロ-ニング出来た。発現用ベクタ-は,VDJ_HーヒトCγ,VJーヒトCrc遺伝子が一本のベクタ-上で発現出来るようにした。発現効率を高めるためH鎖エンハンサ-エレメントをtandemにつなぎ挿入した。また骨髄腫細胞中で,一過性(transient)に効率する抗体産生および分泌が生じるように、ベクタ-がextrachromosomalに増殖し得るようにした。このベクタ-を用いて予備実験を行ったところ,抗ヒトCEA,抗ヒトCAー125抗体を産生させることに成功した。

In this study, we used the DNA method to prepare the antibody for diagnosis and treatment, and used the DNA method to prepare the antibody for diagnosis and treatment. We will discuss in detail the development and control of the immune response gene, and the development and control of the immune response gene. This year's results The DNA method was used to construct the V-domain gene and construct the V-domain gene. The PCR method was used to determine the final sequence of DNA sequences. In the case of a single cell, the cell is ready to be used. VJ_H_C_γ, VJ_Crc_γ,VJ_Crc_Crc_γ,VJ_Crc_γ, VJ_Crc_ The rate of discovery is high. In osteoma cells, transient effects of antibody production and secretion are observed. The anti-CEA and anti-CA125 antibodies were successfully produced.

项目成果

H.Kaneko,M.Nakashima,A.Kudo R.Iwakiri,M.Harada and T.Watanabe.: "Selective IgG deficiency with transcriptional disorder of gamma switching gene and IL4 gene." International Immunology. 2. 661-668 (1990)

H.Kaneko、M.Nakashima、A.Kudo R.Iwakiri、M.Harada 和 T.Watanabe.：“选择性 IgG 缺乏，伴有 γ 开关基因和 IL4 基因的转录障碍。”

H.Koga,H.Kanda,M.Nakashima,Y.Wayanabe,K.Endo and T.Watanabe: "Mouseーhuman chimeric monoclonal antibody to carcinoembryonic antigen (CEA);In vitro and it vivo activities." Hybridoma. 9. 43-56 (1990)

H.Koga、H.Kanda、M.Nakashima、Y.Wayanabe、K.Endo 和 T.Watanabe：“针对癌胚抗原 (CEA) 的小鼠-人嵌合单克隆抗体；体外和体内杂交瘤活性”。 43-56 (1990)

R.Mori,H.Minagawa,S.Sakuma,S.Mohri and T.Watanabe: "“Immunology and Prophylaxis of human Herpesvirus Infection"Herpes simplex virus type I infection in mice with SCID." Plenum Press.Ed.by C.Lopez, 191-197 (1990)

R.Mori、H.Minakawa、S.Sakuma、S.Mohri 和 T.Watanabe：“人类疱疹病毒感染的免疫学和预防”SCID 小鼠中单纯疱疹病毒 I 型感染。” Plenum Press.Ed.by C.洛佩兹，191-197 (1990)

T.Saga,K.Endo,M.Koizumi,Y.Kawamura,Y.Watanabe,J.Konishi,R.Ueda and T.Watanabe: "In vitro and in vivo properties of human/mouse chimeric monoclonal antibody specific for common acute lymphocytic leukemia antigen." J.Nuclear Medicine. 31. 1077-1083 (1990)

T.Saga、K.Endo、M.Koizumi、Y.Kawamura、Y.Watanabe、J.Konishi、R.Ueda 和 T.Watanabe：“针对常见急性呼吸道疾病的人/小鼠嵌合单克隆抗体的体外和体内特性

JーY Wang,M.Oketani and T.Watanabe: "Postive and negative regulation of Ig gene expression by a novel B cell specific enhancer element." Molecular and Cellular Biology. 11. 75-83 (1991)

J-Y Wang、M.Oketani 和 T.Watanabe：“新型 B 细胞特异性增强子元件对 Ig 基因表达的正向和负向调节。分子和细胞生物学”11. 75-83 (1991)。