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ATPase反応阻害作用をもつ海綿由来新規活性ペプチドの一次構造の決定

新型海绵源抑制 ATPase 反应活性肽一级结构的测定

基本信息

批准号：
02808024
负责人：
平塚寿章
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Asahikawa Medical College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02808024/
关键词：
ATPase阻害剤活性ペプチド海綿由来生理活性物質

项目摘要

ミオシン分子の頭部(Sー1)は、筋収縮においてパ-トナ-・タンパク質のアクチンと結合するだけではなく、筋収縮のエネルギ-源となるアデノシンー5'ー三ーリン酸(ATP)を結合して加水分解する作用(ATPase)も合わせもっている。しかしながらミオシンATPaseの活性部位については不明なことが多く、特に分子量が12万もあるSー1上のどの辺の活性部位が局在しているかは、現在最も研究者達が知りたがっていることの一つである。我々はこの点を明らかにするために、ミオシンATPaseの阻害剤を用いる実験を立案した。まず天然由来のミオシンATPase阻害物質を探索することから始め、2年前に沖縄産海綿から分子量6,300のペプチドをミオシンATPaseの阻害剤として単離することに成功した。この新規活性ペプチドは、ミオシンATPase反応や筋収縮を非常に低濃度で阻害するので、ミオシンのみならず各種ATPaseの構造と機能を研究するための有用な試薬として期待されている。この活性ペプチドの一次構造がわかるとこのような研究も非常に進展すると思われるが、現在のところアミノ酸組成以外の情報は得られていない。本研究ではこの活性ペプチドの一次構造を明らかにすることを目的として、原料となる沖縄産海綿を大量に採集し、これから多量の純粋サンプルを調製することを主眼とした。今回当初の採集ポイントのケラマ諸島では原料となる海綿は採集できなかったが、より遠くの与那国島で大量に採集できるポイントを発見した。また、従来行っていた水による抽出のステップをアセトンによる抽出に変えることにより、活性ペプチドの収率を10倍以上も上げることができ、活性ペプチドの一次構造解析への道を拓くことができた。

The head of the molecule (S-1) is bound to the protein by ATP, and the enzyme (ATPase) is bound to the protein by ATPase. The active site of ATPase is unknown. The molecular weight of ATPase is 120,000. The active site of ATPase is unknown. Now, the most researchers know it. We have been working on this issue for a long time. The natural origin of the ATPase inhibitor was first explored and successfully isolated 2 years ago when the sponge was produced with a molecular weight of 6,300 The new regulation of ATPase activity is expected to be useful in the study of the structure and function of ATPase at very low concentrations. The primary structure of this active material is very important to the research of this material. This study focuses on the primary structure, purpose, raw material and production of sponge. This is the first time that we have collected raw materials from the islands. We have collected a large number of raw materials from the islands. The first structural analysis method of the active selection method was developed.