モーター駆動に伴う構造変化を感知するミオシン頭部疎水性ポケットの同定

识别与电机驱动相关的结构变化的肌球蛋白头部疏水袋

• 批准号: 12030202
• 负责人: 平塚 寿章
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Asahikawa Medical College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12030202/
• 关键词: モータータンパク質; ミオシン; タンパク質; 高次構造; 構造変化

ミオシン分子の頭部(S-1)は、ATPを加水分解して得た化学エネルギーを力学エネルギーに変換してアクチンフィラメント上を滑り運動するので「モータータンパク質」と言われている。現在では、S-1重鎖のC端側の軽鎖結合領域がレバーのアームのように働き、ATP加水分解に伴ってS-1は尻尾を振るような動きをしてアクチン上を滑ると考えられている。このようなS-1のモーター駆動には、レバーアーム部分やATPおよびアクチン結合部位以外の部位で起きる構造変化も重要な役割を担うことが示唆されている。ホウ酸誘導体の疎水性蛍光プローブである3-[4-(3-phenyl-2-pyrazolin-1-yl)benzene-1-sulfonylamido]phenylboronic acid(PPBA)のS-1上の結合部位は、ATPやアクチン結合部位とは異なる疎水性ポケットであることはわかっていたが、これがS-1上のどの部位であるのかは不明であった。これを明らかにするためにホウ酸化合物を特異的に結合することが知られているキモトリプシンの立体構造とS-1の立体構造を詳細に比較した。その結果S-1には一次構造だけではなく立体構造上もキモトリプシンの活性部位と高い相同性をもつ領域のあることがわかり、PPBAのホウ酸部分はSer181と反応することが明らかになった。さらに、結合したPPBAの蛍光団はp-ループ、スイッチ1、50kDa-リンカーと呼ばれる疎水性アミノ酸で成る3本のポリペプチド鎖に囲まれることから、この領域が問題とする疎水性ポケットであると同定した。

ミ オ シ ン molecular の を head (1 S) は, ATP hydrolysis し て must た chemical エ ネ ル ギ ー を mechanics エ ネ ル ギ ー に variations in し て ア ク チ ン フ ィ ラ メ ン ト を on slippery り movement す る の で "モ ー タ ー タ ン パ ク quality と said わ れ て い る. Now で は heavy lock の C, S - 1 end side の 軽 combination lock field が レ バ ー の ア ー ム の よ う に 働 き, ATP hydrolysis に with っ て S - 1 は tajiri tail を vibration る よ う な dynamic き を し て ア ク チ ン を on slippery る と exam え ら れ て い る. こ の よ う な S - 1 の モ ー タ ー 駆 dynamic に は, レ バ ー ア ー ム part や ATP お よ び ア ク チ ン combining site outside back で の き る structure - the も cut を bear important な service う こ と が in stopping さ れ て い る. Youdaoplaceholder0 acid-inducer, <s:1> 疎 aqueous 蛍 light, プロ ホウ ブである ブである3-[4-(3-phenyl-2-pyrazolin-1-yl)benzene-1-sulfonylamido]phenylboronic Acid (PPBA) の S - 1 の combining site は, ATP や ア ク チ ン combining site と は different な る 疎 water-based ポ ケ ッ ト で あ る こ と は わ か っ て い た が, こ れ が S - 1 の ど の parts で あ る の か は unknown で あ っ た. こ れ を Ming ら か に す る た め に ホ ウ acid compounds を specific に す る こ と が know ら れ て い る キ モ ト リ プ シ ン の three-dimensional structure と S - 1 の three-dimensional structure を に comparative し た. そ の results S - 1 に は a tectonic だ け で は な く three-dimensional structure on も キ モ ト リ プ シ ン の active site と high い identity を も つ field の あ る こ と が わ か り, PPBA の ホ ウ acid part は Ser181 と anti 応 す る こ と が Ming ら か に な っ た. さ ら に, combined し た PPBA の 蛍 light 団 は p - ル ー プ, ス イ ッ チ 1, 50 kda リ ン カ ー と shout ば れ る 疎 water-based ア ミ ノ acid で into 3 る の ポ リ ペ プ チ ド lock に 囲 ま れ る こ と か ら, こ が の field problem と す る 疎 water-based ポ ケ ッ ト で あ る と with fixed し た.

项目成果

Toshiaki Hiratsuka: "The serine proteinase-like structure enables myosin to bind a novel "back door" probe"(未定).

Toshiaki Hiratsuka：“丝氨酸蛋白酶样结构使肌球蛋白能够结合新型“后门”探针”（待定）。