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バクテリオロドプシンの変性キネティクス

细菌视紫红质的变性动力学

基本信息

批准号：
02680218
负责人：
美宅成樹
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Tokyo University of Agriculture and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

膜タンパク質系は機能的に大変高度なものが多い。しかし、膜タンパク質の構造形成についてはまだ情報が乏しい状態である。つまり、X線回析など構造解析が進んでいないだけではなく、構造形成機構を調べるための変性実験などもまだほとんで行われていない。そこで本研究では、バクテリオロドプシンを例として、膜タンパク質の変性挙動を詳細に調べ、膜タンパク質の立体構造形成機構を明らかにすることを目的としている。変性実験において重要なことは、次の2つのことを明らかにすることである。1つは変性状態の構造がどういう構造をとっているか、もう1つは変性するときにどういう結合が切れるかということである。前者、つまり変性状態の構造の特徴を明らかにするには円二色性(CD)、蛍光、光吸収などのスペクトル測定を用いる。バクテリオロドプシンはレチナ-ルを含んでおり、その光吸収だけでも変性点を検出することができる。そして、二次構造の有無、三次構造の有無などは主としてCD測定により評価する。後者には、親水基や疎水基などが異なる種々の有機溶媒を用い、それらの比較から相互作用を推定する。平衡状態の研究から、アルコ-ルなどの有機溶媒による変性には膜内の水素結合性基の濃度が本質的であり、変性時には三次構造が壊れることがわかった。このことから、三次構造の形成には水素結合が重要である。さらに、熱変性のキネティクスの測定を種々の温度で行った結果、活性化エネルギ-は約30kcal/molであった。それを水素結合の数に換算すると、10個くらいとなり、最近わかったバクテリオロドプシンの分子構造からの評価とほぼ同じである。このことからも膜タンパク質の立体構造の形成には膜内の水素結合が重要であるということが確認された。

The film quality system has a large height and a large number of functions. In the process of structural formation, there is a lack of information. X-ray analysis, structural analysis, structural formation mechanism, structural adjustment, structural adjustment, structural adjustment. This study aims to provide an example of how to modulate the properties of the membrane and how to clarify the mechanism for forming the three-dimensional structure of the membrane. The second is the second time that the first two are important. 1. The structure of the reverse nature state is changed from structure to structure. 1. The structure of the reverse nature is changed from structure to structure. The former, the structural characteristics of the different states, the latter, the former, the latter, the latter, the latter The light absorption spectrum of the light absorption spectrum is different from that of the light absorption spectrum. The existence of secondary and tertiary structures and the determination of CD are evaluated. The interaction between the latter and the organic solvent was estimated. The equilibrium state of organic solvent is different from that of water binding group in membrane. The formation of tertiary structures is important for the combination of water elements. The temperature of the sample was measured and the activation rate was about 30kcal/mol. The number of water binding elements is converted into 10, and the molecular structure of the nearest molecule is evaluated. The formation of the three-dimensional structure of the membrane is important for the combination of water elements in the membrane.