ウィルソン病の遺伝子解析

威尔逊病的遗传分析

• 批准号: 03670507
• 负责人: 児玉 浩子
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Teikyo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03670507/
• 关键词: ウィルソン病; 遺伝子解析

ウィルソン病患者および家族のゲノムDNAを用いて、染色体13q14ーq21に局在する既知のプロ-ブを本症遺伝子の連鎖を検討し、患者および保因者の遺伝子診断法を確立することを目的とした。プロ-ブとしてはESTERASe D(ESD)のcDNAを用いた。まず、日本人でのBamIIを制限酵素とした場合の制限酵素切断片長の多型(RFLPs)を検討した。材断および方法:異なる家系の健康日本人成人10例の血液、およびウィルス病患者2例、その両親、その同胞(2例)の血液から、Federらの方法に準じて、ゲノムDNAを抽出した。抽出したDNAをBamIIの制限酵素で切断し、その後アガロ-スゲルで電気泳動した。ゲル上のDNAをサザンブロット法により、ナイロンフィルタ-に転写した。フィルタ-をプレハイブリダイゼ-ションさせた後、 ^<32>Pで標識したESDのcDNAのプロ-ブとハイブリダイゼ-ションさせ、オ-トラジオクラフィ-を行った。結果および考察:正常日本人のゲノムDNAをBamIIで切断し、ESDのcDNAをプロ-ブにして検討した結果ではRFLPsは認められなかった。またウィルソン病患者およびその家族のゲノムDNAでもRFLPsは認められなかった。Bowcockら、Leeらは、ESDのcDNAをプロ-ブにし、ゲノムDNAをBamIIで切断した時、RFLPsが認められると報告している。私達の結果でRFLPsが認められなかったのは、検討した症例数が少なかったためと思われる。さらに症例数をふやして検討する予定である。またプロ-ブおよび制限酵素をかえて、検討する必要もあると思われる。

The genetic diagnosis of the disease is established by the genetic analysis of the known genes on chromosome 13q14-q21. ESTERASE D(ESD) cDNA was used in the study. The restriction enzyme fragment length polymorphism (RFLPs) of BamII in Japanese is discussed. Methods: 10 healthy Japanese adults from different families were involved in blood, 2 patients with blood disease, 2 relatives and 2 siblings. Feder's method was used to extract DNA. DNA restriction enzymes were isolated and then used to isolate DNA. The DNA of the virus was detected in the virus. The <32>cDNA of ESD is identified by the following methods: The results showed that normal Japanese people had to cut off BamII DNA and ESD cDNA. The patient's family has to have RFLPs. Bowcock, Lee, ESD cDNA, BamII DNA, RFLPs, etc. The number of RFLPs identified as a result of the study was reduced. The number of cases was determined. The enzyme is restricted.