酵母をモデルとした高等動物細胞における増殖制御機構の解析

以酵母为模型分析高等动物细胞的生长控制机制

• 批准号: 04152055
• 负责人: 松本 邦弘
• 金额: $ 6.4万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04152055/
• 关键词: 酵母; 増殖制御; シグナル伝達

本究研では、高等動物細胞における細胞増殖制御機構を明らかにする目的で、酵母をモデル系として、サイクリン/CDC2キナーゼによる細胞周期制御機構について解析を行ない以下の成果を得た。サイクリン/CDC2キナーゼによる細胞周期の調節機構は、酵母からヒトに至るまで保存されていることが明らかになってきた。我々は昨年、酵母のG1-サイクリンの活性を制御する因子としてSGV1キナーゼを同定したが、酵母SGV1キナーゼは、CDC2キナーゼファミリーに属する。そこで、動物細胞においても酵母と同様なG1サイクリンの制御因子が存在するかを検討する目的で、酵母のSGV1キナーゼの機能に関与するヒト遺伝子の分離を行なった。HeLa細胞から作製したcDNAライブラリーをsgv1低温感受性変異株に導入し、低温での増殖を回復させる遺伝子として新しくヒトMSS1を分離した。MSS1は433アミノ酸からなり、その配列はHIV-1 Tatと結合しTatの機能を抑制するヒトTB-Pと42%同一であった。そこで、MSS1がTatの機能に影響するかを、HIV-LTR-CATを用いたCATアッセイ法により解析した。その結果、未分化細胞P19において、MSS1がTatによる転写活性を6-10倍促進することが明らかになった。さらに、Jurkat細胞、HeLa細胞を用して結果から、endogenousなMSS1mRNAのレベルとTatによる転写活性のレベルとの間に、相関関係が見られた。一方、HTLV-taxによる転写活性に対しては、効果は見られなかった。以上の結果から、ヒトMSS1はHIV-1 Tatの機能を促進する細胞側の因子と考えられる。このように、酵母の系を利用して細胞周期及び増殖制御に働く動物細胞の遺伝子を単離に、それらの機能解析を行なうというアプローチは、非常に有効な手段である。

This study aims to clarify the mechanism of cell proliferation control in higher animal cells, and to obtain the following results: Cell cycle regulation mechanism, yeast, yeast The activity control factors of yeast G1-protein and CDC2-protein were determined simultaneously. The purpose of this study is to investigate the relationship between the function of yeast and G1 protein in animal cells and the isolation of G1 protein. HeLa cells were isolated from the cDNA library by introducing a cold sensitive mutant into HeLa cells, and from the cDNA library by recovering from the cold sensitive mutant. MSS1 is 433 percent resistant to HIV-1 Tat binding and 42 percent resistant to Tat binding. MSS1 and CAT function analysis As a result, undifferentiated cells P19 and MSS1 were 6-10 fold more active. The relationship between endogenous MSS1mRNA and Tat mRNA activity was also observed. A party, HTLV-tax, writing activity, fruit, etc. These results indicate that MSS1 promotes the function of HIV-1 Tat. The yeast system utilizes cell cycle and propagation control, and the gene system of animal cells is isolated and analyzed.

项目成果

T.Akiyama: "Phosphorylotion of the retinoblastowr protein by cdk2" Proc.Natl.Acud.Scie.U.S.A.89. 7900-7904 (1992)

T.Akiyama：“cdk2 对视网膜母细胞蛋白的磷酸化”Proc.Natl.Acud.Scie.U.S.A.89。

H.Shibuya: "New human gene encoding a positive modulator of HIV Tat-medialeil traus arti vation" Nature. 357. 700-702 (1992)

H.Shibuya：“编码 HIV Tat-medialeil traus arti vation 正调节剂的新人类基因”Nature。

H.Shibuya: "IL2 are EYF recators atimulate the hematupoietir cell cycle vio differevil signaling puthwongs:demmstration of a novel role for c-myc" cell. 70. 57-67 (1992)

H.Shibuya：“IL2 是 EYF 调节因子，通过不同的信号传导刺激造血细胞周期：说明 c-myc”细胞的新作用。