卵巣癌細胞における薬剤耐性克服薬の新規開発とその機能

克服卵巢癌细胞耐药性的药物新进展及其功能

• 批准号: 04152058
• 负责人: 日高 弘義
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04152058/
• 关键词: 卵巣癌; 薬剤耐性; P糖蛋白; グルタチオン-S-トランスフェラーゼ; アドリアマイシン; W-77; バイオケミカルモデュレーション

卵巣癌の化学療法では薬剤耐性が大きな障害となっており、P糖蛋白やグルタチオンSトランスフェラーゼ(GST)が耐性のメカニズムに関わるとされている。新規開発薬剤W-77がGSTと結合するという事実から我々は、W-77とアドリアマイシン(ADR)耐性との関わりを以下の方法を用いて研究した。ドラッグアフィニティーカラムクロマトグラフィーを用い、W-77とGSTとの結合について調べた。W-77のGST活性抑制効果を吸光度を用いて測定した。卵巣癌耐性株NOS2、NOS3およびADR耐性の細胞株NOS2AR、NOS3ARを確立し、MDR1とGSTの発現を調べた。MTTアッセイでW-77とベラパミリによる癌細胞のADRに対する感受性の変化を測定し比較した。^<14>C-ADRを用い、細胞内のADRの量への薬剤の影響を調べた。[結果]W-77は、直接GSTと強く結合した。W-77は、下拮抗的にGSTの活性を阻害し、1mMグルタチオン、1mMCDNB存在下300μMで47.3%に低下させた。P-糖蛋白とGSTは、耐性株で過剰発現した。ADR感受性試験ではNOS2に対し67.8倍の耐性を持つNOS2ARは10μMW-77の投与により10.6倍に低下するが、10μMベラパミルでは17.5倍であった。NOS3に対し18.8倍の耐性を持つNOS3ARは、10μMW-77の投与により6.0倍に低下するが、10μMベラパミルでは9.6倍であった。耐性株の細胞内ADR量は10μMW-77は10μMベラパミルと共にNOS2ARでは約1.5倍、NOS3ARでは約2.2倍に増加させた。[結語]以上より、W-77は、P-糖蛋白とGSTの両方の活性を阻害することにより耐性を克服することが判明し、それはP-糖蛋白の活性阻害剤であるベラパミルより有効であった。

Chemotherapy for ovarian cancer is a process of increasing resistance to chemotherapy and P-glycoprotein (GST). The following methods were used to study the new development agent W-77 and GST combination. The W-77 and GST were combined and tuned. W-77 GST activity inhibition effect was determined by absorbance. Ovarian carcinoma resistant strains NOS2, NOS3 and ADR resistant cell lines NOS2AR, NOS3AR were established and MDR1 and GST were regulated. The sensitivity of MTT to ADR in cancer cells was measured and compared. <14>C-ADR is used to modulate the effects of chemical agents on the amount of ADR in cells. [Results]W-77 was combined with GST directly. W-77 inhibited GST activity by 47.3% in the presence of 1mM CDNB and 300μM CDNB. P-glycoprotein is present in resistant plants. ADR susceptibility test: NOS2 to 67.8 times the tolerance test: NOS2AR to 10μMW-77 to 10.6 times the tolerance test: NOS2AR to 10μMW-77 to 17.5 times the tolerance test: NOS 2AR to 10μ MW-77 to 10.6 times the tolerance test. NOS3 is 18.8 times more resistant than NOS3AR, 10μ M is 6.0 times less resistant than NOS 3AR, 10μM is 9.6 times less resistant than NOS 3AR. The intracellular ADR level of resistant strains increased from 10μMW-77 to 10μM NOS2AR and NOS3AR by about 1.5 and 2.2 fold, respectively. [Conclusion] W-77 has been found to inhibit the activity of P-glycoprotein and GST.