B型およびC型肝炎ウイルス受容体の解明

乙型和丙型肝炎病毒受体的阐明

• 批准号: 04152107
• 负责人: 鈴木 康夫
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: University of Shizuoka
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04152107/
• 关键词: 肝炎ウイルス; B型肝炎ウイルス; C型肝炎ウイルス; 受容体; 糖鎖; レセプター; 糖タンパク質; シアル酸

B型肝炎(HBV)ウイルスに対する受容体糖タンパク質を初めてヒト肝臓から分離精製することに成功した。先ず、標的細胞への結合および侵入に関与するHBV外皮タンパク質(HBs抗原)粒子を遺伝子工学的に調製し、これと結合するレセプターの超微量測定法を確立した。これは我々がすでにインフルエンザウイルス受容体の検索に開発した方法を応用したものである。その結果、ヒト肝のジョードサリチル酸ナトリウム(LIS)抽出液のシアロ糖タンパク質画分に強い結合活性を見いだした。種々のクロマトグラフィーにより微量成分の活性糖タンパク質をほぼ均一にまで精製することができた。本糖タンパク質はシアリダーゼまたは過ヨーソ酸処理することにより受容体としての活性を消失すること、タンパク分解酵素により徹底的に消化してオリゴ糖ペプチドとしても活性は保持されていることなどから、受容体活性はタンパク質部分でなくシアロ糖鎖に担われていることを見いだした。さらにヒト肝から受容体活性を持つシアロ糖ペプチドをほぼ純粋な形で分離することができた。グリコフォリンやフェツインなどにはHBVの結合活性が認められないことから、これらには無いユニークな糖鎖構造をしていることが示唆された。現在この糖鎖構造を解析中である。また,C型肝炎の受容体に関しては、ウイルスエンヴェロープタンパク質をコードするE,NS1/E2領域をカバーするタンパク質のCHO細胞およびバキュロウイルス系での発現系を利用してヒト肝から検索を始めたところである。

hepatitis B virus (HBV) An ultra-micro assay for the modulation of HBV envelope protein (HBs antigen) particles and their binding to target cells was established. This is the first time I've ever seen a person who's been in a relationship with someone else. As a result, the binding activity of the extract was significantly higher than that of the extract of LIS. The active sugar content of the seed is uniform. The enzyme activity of the sugar receptor is completely eliminated by acid treatment, and the enzyme activity of the sugar receptor is completely maintained. In addition, the receptor activity of the liver is maintained in a stable manner, and the protein is isolated in a pure form. The structure of HBV DNA is very important for HBV DNA synthesis. Now the sugar lock structure is analyzed. In addition, the receptor of hepatitis C is related to the development of CHO cells with high quality in E, NS1/E2 domain.

项目成果

M.Miwa,J.Sugatani,T.Ikemura,Y.Okamoto,et al: "Release of newly synthesized platelet-activating factor(PAF)from human polynuclear-leukocytes under in vivo conditions" J.Immunol.148. 872-880 (1992)

M.Miwa、J.Sugatani、T.Ikemura、Y.Okamoto 等人：“在体内条件下从人多核白细胞中释放新合成的血小板激活因子 (PAF)”J.Immunol.148。

F.R.Jungalwala,D,K.H.Chou,Y.Suzuki,G.D.Maxwell: "Temporal expression of HNK-1 reactive sulfoglucuronyl glycolipid in culture quail trunk neuralcrest cells:Comparison with other developmentally regurated." J.Neurochem.58. 1045-1051 (1992)

F.R.Jungalwala,D,K.H.Chou,Y.Suzuki,G.D.Maxwell：“培养鹌鹑躯干神经嵴细胞中 HNK-1 反应性磺基葡萄糖醛酸糖脂的时间表达：与其他发育调节细胞的比较。”

鈴木 康夫: "細胞接着分子ー糖鎖の認識ー" Mebio. (1993)

铃木康夫：“细胞粘附分子 - 糖链的识别”Mebio（1993）。

鈴木 康夫: "インフルエンザウイルスのシアロ糖鎖識別機構" 蛋白質核酸酵素. 37. 2736-2754 (1992)

Yasuo Suzuki：“流感病毒的唾液酸聚糖识别机制”蛋白质核酸酶37。2736-2754（1992）

鈴木 康夫: "血栓・止血・線溶(松田道生,鈴木宏治編)" 中外医学社, (1993)

铃木康夫：“血栓形成、止血和纤维蛋白溶解（松田道夫和铃木浩司编辑）”中外医学社，（1993）