デングウイルスに対する宿主受容体の同定と感染制御

登革热病毒宿主受体的鉴定和感染控制

• 批准号: 13226108
• 负责人: 鈴木 康夫
• 金额: --
• 依托单位: University of Shizuoka
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13226108/
• 关键词: デングウイルス; 受容体; 宿主; ミクロドメイン; 糖脂質; 糖タンパク質; デング; レセプター

1.デングウイルス感受性細胞の簡便な測定法を開発した。標的細胞に対してウイルス液を反応させ、細胞に吸着したウイルスをウイルス抗体、およびフローサイトメータにより検出する新しい簡便な方法を開発した。2.新しいレセプターアッセイ法を開発し、デングウイルス感受性ヒト赤芽球系細胞に、デング2型ウイルスと特異的結合性を持つタンパク質および糖脂質の存在を明らかにした。東南アジアで流行しているデング2型ウイルスが吸着・感染増殖できる標的細胞としてヒト赤芽球由来の細胞(K-562)を上記の方法により特定した。今回、この細胞を大量培養し、そこから、デング2型ウイルス(D2T7)と特異的結合性を示す物質を探索した。その結果、デング2型ウイルスと特異的に結合するタンパク質(おそらく糖タンパク質)および糖脂質の存在を明らかにした。ウイルス結合性タンパク質はSDS-PAGEによってタンパク質を変性させた状態でもウイルスと結合性を示したことから糖タンパク質であり、ウイルスはそれに含まれる糖鎖へ結合している可能性が強く示唆された。また、本タンパク質は、宿主細胞膜ミクロドメイン(Lipid Raft)に存在する可能性が示唆された。3.ヒト赤芽球系細胞からデング2型ウイルスと特異的に結合する糖脂質の単離に成功した。ヒト赤芽球系細胞(K-562)細胞をクロロフォルム/メタノー抽出、アルカリ水解、イオン交換および吸着クロマトグラフィーなどにより純粋な形で分離することができた。本糖脂質は、TLC上でGM1aとGD1aの間に展開される。現在、この化学構造を解析中である。また、この糖脂質に対するモノクローナル抗体を作成している。これにより、本物質の宿主動物組織・細胞における局在性が明らかにできる。

1. Youdaoplaceholder0 グウ グウ た ス ス ス simple な assay for sensitive cells を developed た た. Target cell に し seaborne て ウ イ ル ス liquid を anti 応 さ せ, cell に sorption し た ウ イ ル ス を ウ イ ル ス antibodies, お よ び フ ロ ー サ イ ト メ ー タ に よ り 検 out す る new し い simple な method を open 発 し た. 2. New し い レ セ プ タ ー ア ッ セ イ method を open 発 し, デ ン グ ウ イ ル ス susceptibility ヒ ト red gemmule cell に, デ ン グ type 2 ウ イ ル ス と specific associativity を hold つ タ ン パ ク qualitative お よ び sugar lipid の exist を Ming ら か に し た. Southeast ア ジ ア で popular し て い る デ ン グ type 2 ウ イ ル ス が sorption, infection raised colonization で き る target cells と し て ヒ ト red gemmule origin の cells (K - 562) を written の way に よ り specific し た. Today back, こ cells の を し, そ こ か ら, デ ン グ type 2 ウ イ ル ス (D2T7) と specific associativity を を す material in exploring し た. そ の results, デ ン グ type 2 ウ イ ル ス と specific に combining す る タ ン パ ク mass (お そ ら く sugar タ ン パ ク qualitative) お よ び sugar lipid の exist を Ming ら か に し た. ウ イ ル ス associativity タ ン パ ク qualitative は sds-page に よ っ て タ ン パ ク qualitative を - sex さ せ た state で も ウ イ ル ス と associativity を shown し た こ と か ら sugar タ ン パ ク qualitative で あ り, ウ イ ル ス は そ れ に containing ま れ る sugar lock へ combining し て い る strong possibility が く in stopping さ れ た. ま た, this タ ン パ ク は, host cell membrane ミ ク ロ ド メ イ ン (Lipid Raft) exist に す が る possibility in stopping さ れ た. 3. ヒ ト red gemmule cell か ら デ ン グ type 2 ウ イ ル ス と specific に combining す る sugar lipid の 単 from に successful し た. ヒ ト red cells (K - 562) を gemmule department ク ロ ロ フ ォ ル ム / メ タ ノ ー extraction, ア ル カ リ hydrolysis, イ オ ン exchange お よ び sorption ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー な ど に よ り pure 粋 な separation form で す る こ と が で き た. This glycolipid に and the でGM1aとGD1a <s:1> on the TLC are に unfolded される. Now, the chemical structure of を is being analyzed in である. Youdaoplaceholder0 and <s:1> glycolipids に are used to form a を て て る る against するモノ ロ ナ ナ ナ を を antibody を. The における localization of the tissue and cells of the host animal of this substance is が clear ら にで にで る る る.

项目成果

Takashi Suzuki: "inhibition of human parainfluenza virus type 1 sialidase by analogs of 2-deoxy-2,3-didehydro-N-acetylneuraminic acid"Glycoconjugate J.. 18. 331-337 (2001)

Takashi Suzuki：“2-脱氧-2，3-二脱氢-N-乙酰神经氨酸类似物对人副流感病毒1型唾液酸酶的抑制”Glycoconjugate J.. 18. 331-337 (2001)

Takashi Suzuki: "Receptor specificities of human respiroviruses"J.Virol.. 75(10). 4604-4613 (2001)

Takashi Suzuki：“人类呼吸道病毒的受体特异性”J.Virol.. 75(10)。

Hughes MT: "Adaptation of influenza viruses to cells expressing low levels of sialic acid leads neuraminidase activity"J.Virol.. 75(8). 3766-3770 (2001)

Hughes MT：“流感病毒对表达低水平唾液酸的细胞的适应导致神经氨酸酶活性”J.Virol.. 75(8)。

Chao-Tan Guo: "A Unique Phosphatidylinositol Bearing a Novel Branched-Chain Fatty Acid from Rhodococcus equi Binds to Influenza Virus Hemagglutinin and Inhibits the Infection of Cells"J. Biochem.. 130. 377-384 (2001)

郭朝潭：“一种独特的磷脂酰肌醇，带有来自马红球菌的新型支链脂肪酸，与流感病毒血凝素结合并抑制细胞感染”J。

Chao-Tan Guo: "Sialidase-resistant sialylphosphatidylethanolamine having a fluorinated sialic acid at C-3 as an inhibitor to both hemagglutinin and sialidase of influenza viruses"Glycobiology. 12. 1-8 (2002)

Chao-TanGuo：“抗唾液酸酶的唾液酸磷脂酰乙醇胺，在 C-3 处具有氟化唾液酸，作为流感病毒血凝素和唾液酸酶的抑制剂”糖生物学。