真核細胞DNAポリメラーゼの発現調節機構

真核DNA聚合酶的表达调控机制

• 批准号: 04152146
• 负责人: 松影 昭夫
• 金额: $ 6.4万
• 依托单位: Aichi Cancer Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04152146/
• 关键词: ショウジョウバエ; マウス; DNA複製遺伝子; DNA修復遺伝子; 発現調節; p53; ホメオボックス遺伝子

本年度は以下の2点で研究の主要な進展があった。(1)ショウジョウバエのDNA複製酵素であるDNAポリメラーゼ(以下pol)αの遺伝子とpolδの促進因子であるPCNAの遺伝子のプロモーターを活性化する共通の配列DREと特異的な結合因子DREFを見いだしたことは昨年報告した。DREFをほぼ均一に精製することに成功し、この因子が,86kDaのポリペプチドの2量体よりなることを証明した。また、精製したDREFが結合する配列がDRE内の8bpのパリンドローム配列であることを、確認した。両遺伝子のプロモーター活性はホメオドメインタンパク質の一つであるzerknullt(zen)によって抑制されるが、この抑制がDREF活性の低下によってもたらされることを見いだした。zen遺伝子の発現は、relがん遺伝子のショウジョウバエホモログであるdorsalによって抑制されることが知られており、この結果はがん遺伝子が分化を抑制すると同時に複製関連遺伝子発現を誘導する機構にせまるものである。(2)マウスの複製関連遺伝子であるPCNA遺伝子と修復遺伝子であるpolβ遺伝子遺伝子の発現調節機構にたいするアデノウイルスE1Aおよびp53の影響を調べた。両遺伝子のプロモーター活性ともE1Aで促進されるが、その標的配列はpolβ遺伝子ではプロモーター内にあるATF/CREB結合配列であるのに対し、PCNA遺伝子ではATF/CREB配列とB2F結合配列の2つであることがわかった。一方、野性型p53はPCNA遺伝子プロモーターを抑制するがpolβ遺伝子プロモーターは抑制しないことを見いだした。後者には、p53の抑制を排除する配列が存在することを証明した。これらの結果は、p53の機能が、DNA損傷の際に複製を抑制し、損傷が修復されるのを待つためのゲノム監視機構であるとの仮説に適合するので興味ぶかい。

This year, the following two major developments in research have been made. (1)DNA replication enzymes in the following regions of the world are known as DNA polymerase chain reaction (pol)α promoter, polδ promoter, PCNA promoter and DRE specific binding factor DREF. DREF was purified uniformly and successfully by a factor of 86kDa. 8 bp in the DRE is aligned with the DREF. The activity of DREF is reduced by zerknullt(zen), which is the most important factor in the activity of DREF. The gene expression of zen gene is inhibited by dorsal inhibition, and the result is inhibition of gene differentiation and induction of replication-related gene expression. (2)The influence of PCNA gene and repair gene on the expression of E1A gene and p53 gene in the replication-related gene regulatory mechanism was investigated. E1A promotes the binding of ATF/CREB to B2F. E1A promotes the binding of ATF/CREB to B2F. A wild type of p53 can inhibit the expression of pol beta protein. The latter is excluded from the list. As a result, the function of p53, the inhibition of replication during DNA damage, the repair of damage, and the monitoring mechanism of DNA damage have been investigated.

项目成果

Yamaguchi,M.,Hayashi,Y.,Hirose,F.,Matsuoka,S.,Shiroki,K.and Matsukage,A.: "Activation of the mouse proliferating cell nuclear antigen gene premoter by adenovirus type 12 EIA proteins" Jpn.J.Cancer Res.83. 609-617 (1992)

Yamaguchi，M.，Hayashi，Y.，Hirose，F.，Matsuoka，S.，Shiroki，K. 和 Matsukage，A.：“腺病毒 12 型 EIA 蛋白对小鼠增殖细胞核抗原基因 premoter 的激活”Jpn。

Yamaguchi,M.,Kuroda,K.,Hirose,F.,and matsukage,A.: "Distribution of DNA polymwrase α during nuclear division cycles in drosophila melanogaster embryo" Cell Struct.Funct.17. 105-112 (1992)

Yamaguchi, M.、Kuroda, K.、Hirose, F. 和 Matsukage, A.：“果蝇胚胎核分裂周期中 DNA 聚合酶 α 的分布”Cell Struct.Funct.105-112 (1992)。

Yamaguchi,M.,Hayashi,Y.,Hirose,F.,Shiroki,K.and Matsukage,A.: "Activation of the mouse DNA polymerase β gene promoter by adenoviras type 12 EIA proteins" Nucleic Acids Res.20. 2321-2325 (1992)

Yamaguchi, M.、Hayashi, Y.、Hirose, F.、Shiroki, K. 和 Matsukage, A.：“12 型 EIA 蛋白对小鼠 DNA 聚合酶 β 基因启动子的激活”核酸 Res.20-。 2325 (1992)

Date,T.Tanikara,K.,Yamamoto,S.,Nomura,N.and Matsukage,A.: "Two regions in human DNA polymerase β MRNA supprels translation in Escherichia coli" Nudeic Acids Res.20. 4859-4864 (1992)

Date, T. Tanikara, K.、Yamamoto, S.、Nomura, N. 和 Matsukage, A.：“人类 DNA 聚合酶 β mRNA 中的两个区域支持大肠杆菌中的翻译”Nudeic Acids Res. 20. 4859-4864 (1992) ）

Hirose,F.,Yamahuchi,M.,Handa,H.,Inomata,Y.,and Matsukage,A.: "Novel 8-hasepair seguence (Drosophila DNA replicationrelated alement)and specifil binding factor involvedin the expresion of Drosophila genes for DNA nolemerase α and proliferating cell nuclear

Hirose, F.、Yamahuchi, M.、Handa, H.、Inomata, Y. 和 Matsukage, A.：“新型 8-hasepair 序列（果蝇 DNA 复制相关元件）和参与果蝇 DNA 基因表达的特异性结合因子nolemerase α 和增殖细胞核