Development of methods for using fission yeast as a test tube for analyzing highly complex biological systems

开发使用裂殖酵母作为试管来分析高度复杂的生物系统的方法

• 批准号: 04557011
• 负责人: OKAYAMA Hiroto
• 金额: $ 9.79万
• 依托单位: The University of Tokyo, Faculty of Nedicine (1993-1994)Osaka University (1992)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Developmental Scientific Research (B)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 1994
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04557011/
• 关键词: cDNA library; expression cloning; transcomplementation; gene transduction; fission yeast; mammals; cell cycle control; 同種間遺伝子相補; 細胞周期; 相同組換え; チェックポイント機構; クローニング; 異種間相補; cDNA; 遺伝子破壊; G2制御; wee1; cdc25; G2期制御

We developed the following methods for utilizing fission yeast as a live test tube to examine mammalian highly complex biological systems. The methods developed include : 1)a highly efficient fission yeast transformation method ; 2)efficient yeast vectors for transducing cDNA expression libraries ; 3)an efficient vector for construction of mammalian expression cDNA libraries and transduction in fission yeast ; 4)isolation of non-essential genes that can e used for target sites for gene replacement by homologous recombination.By using the developed methods, we succeeded in isolation of very important cell cycle control genes from mammals as well as fission yeast. They include : 1)Minl gene from mammals ; 2)Wos A,B genes from mammals ; 3)Cdc25A Phosphatase gene from mammals ; 4)repl from fission yeast ; 5)resl from fission yeast ; 6)cdsl from yeast.

我们开发了以下方法，利用裂殖酵母作为活试管来检查哺乳动物高度复杂的生物系统。开发的方法包括：1）高效裂殖酵母转化方法； 2）高效酵母载体转导cDNA表达文库； 3）用于构建哺乳动物表达cDNA文库并在裂殖酵母中转导的高效载体； 4）通过同源重组分离可用于基因替换靶位点的非必需基因。通过使用所开发的方法，我们成功地从哺乳动物和裂殖酵母中分离出非常重要的细胞周期控制基因。它们包括：1）来自哺乳动物的Minl基因； 2）来自哺乳动物的Wos A、B基因； 3)来自哺乳动物的Cdc25A磷酸酶基因； 4)来自裂殖酵母的repl； 5)来自裂殖酵母的resl； 6)来自酵母的cdsl。

项目成果

Tamura,K.: "Cyclin G:A new mammalian cyclin with a homology to fission yeast Cigl." Oncogene. 8. 2113-2118 (1993)

Tamura,K.：“细胞周期蛋白 G：一种新的哺乳动物细胞周期蛋白，与裂殖酵母 Cigl 具有同源性。”

Otsu,M.: "Isolation of two members of rat MAP kinase gene family." FEBS Let.320. 246-250 (1993)

Otsu,M.：“大鼠 MAP 激酶基因家族的两个成员的分离。”

Miyamoto M., Tanaka K.and Okayama H.: "a res2+, new member of the cdc10+/SWI4 family, controls the 'start'of mitotic and meiotic cycles in fission yeast." EMBO J.13. 1873-1880 (1994)

Miyamoto M.、Tanaka K. 和冈山 H.：“res2 是 cdc10 /SWI4 家族的新成员，控制裂殖酵母有丝分裂和减数分裂周期的‘开始’。”

岡山博人: "遺伝子と医学 動物細胞の細胞周期制御機構" 日本医学会, 91 (1993)

冈山宏人：《基因与医学：动物细胞的细胞周期控制机制》日本医学会，91（1993）

Obara-Ishihara T.and Okayama H.: "A B-type cyclin negatively regulates conjugation via intereacting with cell cycle 'start'genes in fission yeast." EMBO J.13. 1863-1872 (1994)

Obara-Ishihara T. 和冈山 H.：“B 型细胞周期蛋白通过与裂殖酵母中的细胞周期‘起始’基因相互作用来负向调节接合。”