神経特異的新規細胞認識分子BIG-1及びBIG-2の構造の機能の解析

神经元特异性新型细胞识别分子BIG-1和BIG-2的结构和功能分析

• 批准号: 05770089
• 负责人: 吉原 良浩
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Osaka Medical College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770089/
• 关键词: BIG-1; BIG-2; イムノグロブリン・スーパーファミリー; 神経系特異的発現; 神経突起伸長促進作用

神経系の発達過程において多種多様な細胞認識・接着分子が重要なはたらきを演じている。申請者は、特にマルチ・ジーン・ファミリを形成し複雑な神経回路網形成に必要な多様性を分子内につくりうるイムノグロブリン・スーパーファミリー(IgSF)に着目し、新規分子の探索を行ってきた。その結果、混合プライマーを用いたPCR法を用いた実験により、神経系に特異的に発現するふたつの新規IgSF分子(BIG-1、BIG-2)を発見した。平成5年度においては、BIG-1、-2の一次構造の解明、詳細な発現様式の解析、さらに機能的役割の解析を行った。1.BIG-1及びBIG-2の一次構造の解明PCR法で得たcDNA断片を用いてプラーク・ハイブリダイゼーション法により、ラット脳cDNAライブラリーをスクリーニングした。その結果、BIG-1に関してはその全一次構造を、またBIG-1に関してはその翻訳領域の大部分を決定することができた。ホモロジー検索によって、BIG-1、-2ともにIgSFの中のTAG-1/F3サブグループに属することが明らかとなった。2.BIG-1及びBIG-2の発現様式の解析ノザン・ブロット法によりBIG-1、-2ともに神経系に特異的に発現していることが確認された。また、その発現量は胎生期には非常に低く、出生後増加しはじめ、成体において最高となることがわかった。さらにinsitu hybridization法によってその詳細な分布を調べたところ、BIG-1、-2ともに神経細胞のサブセットに発現しているが、その局在は大きく異なっていた。例えば、小脳においてはBIG-1はプルキンエ細胞、BIG-1は顆粒細胞、海馬においてはBIG-1は歯状回、BIG-2はCA1領域というように異なった神経細胞に発現していた。3.BIG-1による神経突起伸長促進作用の発見全一次構造が決定されたBIG-1に関して機能アッセイを行った。遺伝子工学的に産生したBIG-1タンパク質をコートしたプレートにラット小脳細胞を培養すると、顕著な神経突起の伸長が観察された。

The evolution of the nervous system involves a variety of cellular processes and subsequent molecular processes. The applicant is interested in exploring new molecules in order to form a complex network of neural networks with the necessary diversity. As a result, new IgSF molecules (BIG-1, BIG-2) were discovered by PCR in the middle of the study. Analysis of primary structure, detailed development mode and service division of BIG-1 and-2 in Heisei 5 1. The cDNA fragments of BIG-1 and BIG-2 were obtained by PCR. As a result, BIG-1 is related to all primary structures, and BIG-1 is related to most of the inverted domain. The TAG-1/F3 in the TAG-1/F3 of the tag-1/F3 belongs to the TAG-1/F3. 2. The analysis of BIG-1 and BIG-2's evolution was carried out by using the method of bioluminescence. The amount of development is very low in the prenatal period, increases after birth, and reaches the highest level in the adult period. In addition, the insitu hybridization method is used to adjust the detailed distribution of the protein, BIG-1,-2 and the protein in the brain cells. For example, BIG-1 cells, BIG-1 granulosa cells, BIG-1 dentate gyrus, BIG-2 CA1 cells, BIG-1 cells, BIG-2 CA1 cells, BIG-1 cells, BIG-1 cells, BIG-2 CA1 cells, BIG-1 cells, BIG-2 cells, BIG-1 cells, BI 3. The development of BIG-1 neurite elongation promotion is determined by the primary structure of BIG-1. BIG-1 is a gene engineering tool for detecting the growth and development of small cells.

项目成果

Nemoto,Y.: "R2D5 antigen.a calcium-binding phosphoprotein predominantly expressed in olfactory receptor neurons." Journal of Cell Biology. 123. 963-976 (1993)

Nemoto,Y.：“R2D5 抗原。一种主要在嗅觉受体神经元中表达的钙结合磷蛋白。”

Katoh,K.: "Development of glomerular structure in rabbit olfactory bulb." NeuroImage. (in press). (1994)

Katoh,K.：“兔子嗅球肾小球结构的发育。”