CRK遺伝子を介する細胞内信号伝達の機構

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チロシンキナーゼの下流因子として、SH2領域を持つ蛋白が重要な働きをすることは、研究代表者やその他の研究者等により、既に明らかにされている。本年度は、このSH2領域を有する蛋白群の内、アダプター分子として知られているCRK蛋白の機能解析を行った。CRKはSH2以外にSH3という領域を有しており、これが、CRK蛋白の信号伝達の下流因子と結合する部位である。我々は、このSH3領域を大腸菌に発現させ、これをプローブとしたFar Western blotting法を改良し、これを用いて、発現ライブラリーをスクリーニングすることにより、CRK蛋白のSH3領域に結合する蛋白のcDNAを得た。この内の一つについて、解析を進め、これが、新しいRas蛋白の活性化因子であることを明らかにし、これにC3G(CRK SH3-binding guanine nucleotide releasing protein)と命名した。さらに、この蛋白に対する抗体を作製し、これを用いて解析を行った。C3Gはもう一つのアダプター分子であるGrb2にも結合している。これらのアダプター分子とC3Gとの結合は増殖因子の刺激により変化しない。以上のことより、CRKやGrb2といったアダプター分子はそのSH3を介 して、幾つかの分子と常に結合しており、この合体はチロシンキナーゼの活性化により、アダプター分子のSH2を介して、リン酸化チロシンを含むタンパクと結合し、その信号を受け取ることがわかった。