CRK前癌遺伝子産物に結合する信号伝達下流因子の解析

与CRK癌前基因产物结合的下游信号因子分析

• 批准号: 07770174
• 负责人: 松田 道行
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: 国立予防衛生研究所
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770174/
• 关键词: CRK; チロシンキナーゼ; SH3領域

Crk蛋白に結合する細胞内情報伝達因子群の中で、最も量的に多い180kDa蛋白の分子クローニングを行なった。Crk蛋白のSH3領域をプローブとしたファーウエスタン法により、発現ライブラリーをスクリーニングし、陽性クローンを得て、その核酸から抗体を作製し、180kDa蛋白のcDNAをコードするものを同定した。さらに、このcDNA断片をプローブとしてcDNAライブラリーをスクリーニングし、全長のcDNAを得た。Crkの下流因子であることから、downstream of Crk 180 kDa protein; DOCK180と命名した。DOCK180は、1次アミノ酸配列上で、そのアミノ末端がわにSH3領域をゆうしている以外には、既存の蛋白と相同性を有しておらず、新たな情報伝達分子であることが判明した。DOCK180のmRNAは、末梢血を除くすべての組織で発現されているので、DOCK180は細胞の基本的な機能に関与するらしい。DOCK180を細胞内に過剰発現させても、あきらかな変化は認めれられなかった。しかし、DOCK180のカルボキシル末端側にRasのCAAX領域を結合させると、DOCK180は細胞膜に局在するようになり、細胞を大きく偏平化させる活性が検出できた。この事は、DOCK180がチロシンリン酸化酵素から、細胞骨格系に情報を伝播する新しい機能分子であることを強く示唆している。また、DOCK180の染色体上の位置をFISH法を用いて同定し、染色体10番に存在することを証明した。

Crk protein binds to the most abundant 180kDa protein molecule in the group of intracellular intelligence factors. SH3 domain of Crk proteinタン法により、発现ライブラリーをスクリーニングし、 Positive nucleic acid test, nucleic acid test antibody test, and 180kDa protein cDNA test result.さらに, このcDNA fragment をプローブとしてcDNAライブラリーをスクリーニングし, full-length のcDNAを得た. Crk's downstream factor, downstream of Crk 180 kDa protein; DOCK180 is named. DOCK180は, 1st アミノacid sequence upper で, そのアミノ terminal がわにSH3 field をゆうしているOther than that, the existing protein has the same identity, and the new information has been discovered. DOCK180's mRNA, peripheral blood removal and tissue removal, and DOCK180's basic cell function and function. DOCK180 can detect the changes in cells and cause changes in cells. D OCK180 is a cell membrane localizer, a large cell membrane, a partial flattener, and an active cell membrane.この事は, DOCK180 がチロシンリン acidifying enzyme から, cytoskeleton Department of information, new and functional molecules, strong and powerful elements. The location on the chromosome of DOCK180 was determined by FISH method, and the existence of chromosome 10 was confirmed by FISH method.