チロシンキナーゼおよびG蛋白によるHIV感染性の制御機構

酪氨酸激酶和G蛋白控制HIV感染的机制

• 批准号: 09258231
• 负责人: 松田 道行
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Research Institute, International Medical Center of Japan
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09258231/
• 关键词: HIV; Hck; Src; チロシンキナーゼ; Nef

HIVの感染性をSrc型チロシンキナーゼがどのように制御するかについて研究した。まず、Src型チロシンキナーゼのうち、マクロファージに多く存在することが知られているHckのアミノ末端側半分を発現するベクターを作成し、産生される蛋白をHckNと命名した。同様の構築のSrcチロシンキナーゼは内在性のSrcに対して抑制性に働くことが知られており、優勢劣性変異体となる。HIVプロウイルスNL432とHckNを同時に発現させるとHIVの感染性が約30%に低下することを見出した。HckNのSH2ドメインに変異を入れてもこの抑制効果に変化は無かったが、SH3ドメインに変異をいれると、この抑制効果が完全に失われた。次に、どういう機序でHckNがHIVの感染性を低下させるかを調べるために、VSVのpseudotypeを作成したところ、HckNの影響はまったく認められなかった。このことは、HIVの細胞内侵入にHckNの影響があることを示唆する。そこで、HIVのT細胞に対する侵入効率を測定したところ、HckNはHIVの侵入効率を約30%に低下させていた。ウイルス上のgp120を測定したが、あきらかな差は認められなかった。また、Hckと結合することが知られているNef蛋白を欠失した変異体に対するHckNの影響を調べたが、HckNはこの変異体も野生型同様に抑制した。以上の結果は、HckNがNef非依存性にHIVのgp120を機能的に阻害することを示唆し、逆に、Src型チロシンキナーゼの活性がHIVの標的細胞への侵入に必要なことを意味しているものと思われる。

HIV infectious を の type Src チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ が ど の よ う に suppression す る か に つ い て research し た. ま ず, Src チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ の う ち, マ ク ロ フ ァ ー ジ に す more く る こ と が know ら れ て い る Hck の ア ミ ノ end side half を 発 now す る ベ ク タ ー を し, consummate produce さ れ る protein を HckN と named し た. With others in の build の Src チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ は internality の Src に し seaborne て inhibitory に 働 く こ と が know ら れ て お り, advantage embodied - variant と な る. HIV プ ロ ウ イ ル ス NL432 と HckN を simultaneously に 発 now さ せ る と の HIV infective が about 30% low に す る こ と を shows し た. HckN の SH2 ド メ イ ン に - different を into れ て も こ の inhibition of unseen fruit に variations change は no か っ た が, SH3 ド メ イ ン に - different を い れ る と, こ の inhibition of unseen fruit が に completely lost わ れ た. に, ど う い う machine sequence で HckN が の HIV infective を low さ せ る か を adjustable べ る た め に, types of の pseudotype を made し た と こ ろ, HckN の influence は ま っ た く recognize め ら れ な か っ た. The intracellular invasion of にHckN <e:1> by HIV <s:1> affects がある とを とを and する. そ こ で, HIV の t-cell に す seaborne る into sharper rate determination of を し た と こ ろ, HckN は の HIV invades low working rate about 30% に を さ せ て い た. On ウ イ ル ス の gp120 を determination し た が, あ き ら か な poor は recognize め ら れ な か っ た. ま た, Hck と combining す る こ と が know ら れ て い る Nef protein を owe lost し た - variant に す seaborne る HckN の influence を adjustable べ た が, HckN は こ の - variant も wild type with others に inhibit し た. の above results は, HckN が Nef non dependency に HIV の gp120 を function に resistance against す る こ と を business し, inverse に, Src チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ の active が の HIV target cells へ の intrusion に necessary な こ と を mean し て い る も の と think わ れ る.

项目成果

Takahashi,H.et al.: "The role of topoisomerase I in HIV-1 replication." Leukemia. 11. 113-115 (1997)

Takahashi,H.et al.：“拓扑异构酶 I 在 HIV-1 复制中的作用。”

Tokunaga,K..et al.: "Inhibition of HIV-1 virion entry by dominant negative Hck." J.Virol.(in press). (1998)

Tokunaga,K..et al.：“显性阴性 Hck 抑制 HIV-1 病毒体进入。”