びまん性肺疾患におけるサーファクタント・プロテイン-A(SP-A)に関する研究

表面活性蛋白-A（SP-A）在弥漫性肺疾病中的研究

• 批准号: 05770392
• 负责人: 諏訪部 章
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Yamagata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770392/
• 关键词: びまん性肺疾患; サーファクタント; SP-A; 肺胞II型上皮細胞

サーファクタント・プロテイン-A(SP-A)は、サーファクタント特異蛋白の一つであり、脂質の気層液層界面への吸着促進、II型肺胞上皮細胞を介する脂質の取り込み促進および分泌抑制、血清由来サーファクタント阻害因子の不活化、肺胞マクロファージの貧食促進、など多彩な機能を営んでいる。しかし、正常ヒト肺からのSP-Aの分離はこれまで報告がなく、また成人呼吸窮迫症候群や特発性肺線維症など難治性肺疾患におけるSP-Aの動態および機能に関する情報は乏しい。今回我々は、これまで繁雑であったSP-A精製の簡易化を試み、微量臨床検体からSP-Aを分離精製しその動態および機能の追及を目的とした。今年度前半は、基礎的検討として、まずラット肺洗浄液からサーファクタントを精製しSP-A分離を試みた。その結果、精製サーファクタントをEGTAで処理しカルシウムをキレートするとSP-Aがサーファクタント脂質より遊離した。このことから、SP-Aがカルシウム依存性にサーファクタント脂質に結合することが判明し、この性質がSP-A精製に応用可能であることを証明した。その成果は裏面の如く論文掲載予定である(J.Jpn.Med.Soc.Biol.Interface.,1994,In press).今年度後半はこのシステムを臨床検体に応用すべく実験を進めてきた。臨床検体としては各種肺疾患患者の気管支鏡検査時の気管支肺胞洗浄液または剖検者の肺洗浄液を用い、現在までこれら洗浄液から数回の超遠心を繰り返すことによりサーファクタントを精製してきた。現在、前半の基礎的データをもとにカルシウムキレート法によりSP-A精製を行っている。またその構造的特徴および機能をSDS電気泳動やゲル炉過法による蛋白分析およびラットII型肺胞上皮細胞を介するサーファクタント脂質の分泌抑制能によりそれぞれ検討し論文掲載予定である。

サ ー フ ァ ク タ ン ト · プ ロ テ イ ン -a は (SP - A), サ ー フ ァ ク タ ン ト の A specific protein つ で あ り, lipids の 気 liquid layer interface へ の sorption, type II cell lung epithelial cells を interface す る lipid の take り 込 み promote お よ び secretion inhibition, serum origin サ ー フ ァ ク タ ン ト resistance factor の is not activated, lung cell マ ク ロ フ ァ ー ジ の Poor diet promotes, な な multicolor な function を営んで る る. し か し, normal ヒ ト lung か ら の SP - A の separation は こ れ ま で report が な く, ま た forced poor adult respiratory syndrome や, 発 sex disease of lung line d な ど refractory pulmonary disease に お け る SP - A dynamic お の よ び function に masato す る intelligence は spent し い. Today to my 々 は, こ れ ま で numerous 雑 で あ っ た SP - A refined の facilitation を try み, trace clinical 検 か ら SP - A を separation of refined し そ の dynamic お よ び function の chase and を purpose と し た. Our first half は, basic beg と 検 し て, ま ず ラ ッ ト lung fluid at か ら サ ー フ ァ ク タ ン ト を refined し SP - try A separation を み た. そ の results, refined サ ー フ ァ ク タ ン ト を EGTA で 処 Richard し カ ル シ ウ ム を キ レ ー ト す る と SP - A が サ ー フ ァ ク タ ン ト lipid よ り free し た. こ の こ と か ら, SP - A が カ ル シ ウ ム dependency に サ ー フ ァ ク タ ン ト lipid に combining す る こ と が.at し, こ の nature が SP - A refined に 応 may use で あ る こ と を prove し た. Result は の inside such as く そ の first white jasmines load designated で あ る (J.J pn. Med. Soc. Biol. Interface., 1994, In press). In the second half of this year, the clinical 検 body に応 used すべく laboratory を to enter めて た た た. Clinical 検 body と し て は variety of pulmonary disorders の 気 tube when a mirror 検 check の 気 tube branch of lung cell liquid at ま た は cutting 検 is の lung fluid を い, now at ま で こ れ ら fluid at か ら number back の buzzer-beaters heart を Qiao り return す こ と に よ り サ ー フ ァ ク タ ン ト を refined し て き た. Now, the first half of the の based デ ー タ を も と に カ ル シ ウ ム キ レ ー ト method に よ り SP - A line of refined を っ て い る. ま た そ の structure of 徴 お よ び function を SDS electric 気 swimming や ゲ ル furnace way に よ る protein analysis お よ び ラ ッ ト type II lung epithelial cells of the cellular を interface す る サ ー フ ァ ク タ ン ト lipid secretion の can inhibit に よ り そ れ ぞ れ beg し 検 paper first white jasmines load designated で あ る.

项目成果

高橋敬治,諏訪部章,中村秀範: "サーファクタントプロテイン" 呼吸. 12. 418-426 (1993)

Keiji Takahashi、Akira Suwabe、Hidenori Nakamura：“表面活性剂蛋白”呼吸。12. 418-426 (1993)

A.Suwabe,K.Takahashi,D.R.Voelker,RJ Mason: "Calcium dependent binding of surfactant protein-A(SP-A)to surfactant lipids:Application to a simple purification of SP-A." J.JPN.Med.Soc.Biol.Interface. 25 (in press). (1994)

A.Suwabe、K.Takahashi、D.R.Voelker、RJ Mason：“表面活性剂蛋白 A(SP-A) 与表面活性剂脂质的钙依赖性结合：在 SP-A 简单纯化中的应用。”

板坂美代子,諏訪部章,八鍬直,高橋敬治,宮澤光瑞: "肺胞表面物質および構成細胞と好中球の相互作用に関する基礎的検討" 山形医学. 11. 71-82 (1993)

Miyoko Itasaka、Akira Suwabe、Nao Yakuwa、Keiji Takahashi、Mitsui Miyazawa：“肺泡表面物质以及组成细胞和中性粒细胞之间相互作用的基础研究”Yamagata Medical。

諏訪部章,高橋敬治: "肺胞II型細胞のサーファクタント分泌に及ぼすサーファクタント蛋白とリン脂質の作用" 日胸疾会誌. 31. 317-323 (1993)

Akira Suwabe、Keiji Takahashi：“表面活性剂蛋白和磷脂对 II 型肺泡细胞表面活性剂分泌的影响”日本胸科学会杂志 31. 317-323 (1993)。

K.Otake,A.Suwabe・N.Yakawa,H.Suzuki,K.Takahashi: "Effects of artificial surfactant(Surfacten)on human neutroplul functions." J.Jpn.Med.Soc.Biol.Interface. 24. 84-92 (1993)

K.Otake、A.Suwabe、N.Yakawa、H.Suzuki、K.Takahashi：“人工表面活性剂 (Surfacten) 对人类中性粒细胞功能的影响。”J.Jpn.Med.Soc.Biol.Interface。 92（1993）