エイズウイルス固有のプロテアーゼの合成研究

艾滋病病毒特异性蛋白酶的合成研究

• 批准号: 05772024
• 负责人: 木村 徹
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kyoto Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05772024/
• 关键词: エイズ; レトロウイルス; プロテアーゼ; ペプチド合成; アフィニティークロマトグラフィー; プロテアーゼ阻害剤

現在、エイズウイルスプロテアーゼの特異的阻害剤は副作用の極めて少ないエイズ治療薬として使用できるのではないかと有望視されている。そこでエイズ治療薬としての特異的プロテアーゼ阻害剤の開発に役立てる為に、エイズウイルス固有のプロテアーゼの化学合成を行った。1ペプチド鎖をtBoc型固相法により構築した。この際合成手順として我々の開発した効率的固祖合成法を用いた。また別に合成したフラグメントを使用してペプチド鎖の構築も行った。アミノ酸分析の結果より樹脂担体上でのペプチド鎖の構築はほぼ満足できるものであった。2合成したペプチド樹脂の一部を使用してアミノ端末を延長しビオチンを結合した誘導体及びチオール基に基ずくアフィニティーラベルを結合した誘導体を合成した。3合成したペプチド樹脂を無水フッ化水素処理により、全保護基の除去及び樹脂胆体からの脱理を行い、これをゲルろ過により精製して部分精製品を得た。この部分精製プロテアーゼは、別途合成した基質ペプチドを用いたアッセイ系において特異的でかつ強い基質分解能を有していた。4アビジン、阻害剤またはヨウ化アセチル基を結合した固定相を使用した各種アフィニティークロマトグラフィーで精製を試みた。しかしいずれの場合も非特異的吸着による不純物の混入が著しく、十分な精製は出来なかった。これはこのプロテアーゼが疎水性の高い物質であり、水溶性に乏しい為であると考えられる。部分誠意瀬プロテアーゼと基質ペプチドはプロテアーゼ阻害剤の活性測定に使用した。この結果の一部は第31回ペプチド化学討論会及び日本薬学会第114年会にて報告する。

Now, the specific side effects of the inhibitor are extremely small and the therapeutic agent is expected to be used. The chemical synthesis of a specific inhibitor is carried out in the presence of a therapeutic agent. 1. Construction of a solid phase reactor The application of solid state synthesis in the development of synthetic methods The structure of the system is composed of two parts. The results of acid analysis showed that the structure of the resin support was stable. 2. A part of the resin is synthesized by combining the inducer and the radical. 3. The resin is anhydrous, the protective group is removed, and the resin core is removed. This part of the refinement of the matrix can be used in the synthesis of different kinds of matrix. 4. The use of a fixed phase in the treatment of diseases The mixture of impurities in non-specific adsorption and purification is very refined. The water soluble substances are not soluble in water. Part of the matrix was used to determine the activity of the enzyme. Part of the results were presented at the 31st Annual Chemical Symposium and the 114th Annual Meeting of the Japanese Academy of Sciences.

项目成果

H.Enomoto: "Structure-activity relationships of tripeptide HIV protease inhibirors containing the hydroxymethylcarbonyl isostere." Peptide Chemistry 1993. 181-184 (1994)

H.Enomoto：“含有羟甲基羰基电子等排体的三肽 HIV 蛋白酶抑制剂的结构-活性关系。”

Y.Kiso: "The promising ant-HIV agent,kynostatin(KNI)-272: a highly selective and super-active HIV-inhibitor containing allophenylnorstatine." Peptides. in press. (1994)

Y.Kiso：“有前途的抗 HIV 药物，kynostatin(KNI)-272：一种含有别苯基去甲他汀的高选择性和超活性 HIV 抑制剂。”