ジスルフィド架橋型HIVプロテアーゼダイマー誘導体の合成研究

二硫桥HIV蛋白酶二聚体衍生物的合成研究

• 批准号: 13771345
• 负责人: 木村 徹
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyoto Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771345/
• 关键词: ケミカルリゲーション; プロテアーゼ; 固相ペプチド合成; HIV; AIDS

HIVプロテアーゼは99アミノ酸よりなるアスパルチックプロテアーゼで,ホモダイマーを形成して活性を発現する.そこで会合阻害型HIVブロテアーゼ阻害剤の活性を正確に評価するために,サブユニット間の解離が起こらない共有結合で架橋されたプロテアーゼ誘導体を合成することを計画した.本研究ではケミカルリゲーション法を用いて,HIVプロテアーゼ誘導体(モノマーユニット,10kDa)の合成を行い,次いでジスルフィド結合で架橋しダイマー誘導体(20kDa)と変換する計画を立てた.本年度は,平成13年度の計画にて実施した1)ペプチドセグメントの合成,2)HIVプロテアーゼ誘導体(モノマーユニット,10kDa)の合成,3)HIVプロテアーゼタイマー誘導体(20kDa)の合成に引き続いて,得られたプロテアーゼ誘導体の評価を行った.4)HIVブロテアーゼ誘導体の活性測定 得られたHIVプロテアーゼダイマー誘導体を透析によりリフォールディングしたところ,合成基質を用いたアッセイ系において特異的な酵素活性を示した.またその活性はリコンビナント酵素とほぼ同等であった.5)既存のHIVプロテアーゼ阻害剤に対する感受性の評価 プロテアーゼ阻害型KNI-272およびKNI-764を用いて,ダイマー化誘導体酵素と天然型酵素との感受性の違いを評価したところ,ダイマー誘導体はやや阻害剤感受性が低下していた.6)HIVプロテアーゼ会合阻害に基づく阻害剤の合成 HIVプロテアーゼのサブニニット間の会合を阻害することにで活性を発現するペブチドを,Fmoc型固相ペブチド合成法により合成した.7)会合阻害型プロテアーゼ阻害剤に対する感受性の評価 上記阻害剤によるプロテアーゼ阻害活性を測定したところ,天然型ブロテアーゼに比べダイマー型酵素は活性低下が少ないことを確認できた.

HIV said that it was not possible to see if it was active. The activity of HIV

项目成果

Azin Nezami, Irene Luque, Tooru Kimura, Yoshiaki Kiso, Ernest Freire: "Identification and characterization of allophenylnorstatine-based inhibitors of plasmepsin II, an antimalarial target"Biochemistry. 41(7). 2273-2280 (2002)

Azin Nezami、Irene Luque、Tooru Kimura、Yoshiaki Kiso、Ernest Freire：“抗疟靶标血浆蛋白酶 II 的别苯基去甲他汀抑制剂的鉴定和表征”生物化学。

H.Matsurnoto, T.Kimura, T.Hamawaki, A.Kumagai, T.Goto, K.Sano, Y.Hayashi, Y.Kiso: "Design, synthesis, and biological evaluation of anti-HLV double-drugs : conjugates of HIV protease inhibitors with a reverse transcriptase inhibitor through spontaneously c

H.Matsunoto、T.Kimura、T.Hamawaki、A.Kumagai、T.Goto、K.Sano、Y.Hayashi、Y.Kiso：“抗 HLV 双药的设计、合成和生物学评价：结合物

S.Rajesh et al.: "An expedient synthesis of Na^α-protected-L-tetrahydrofuranylglycine and its application in the synthesis of novel substrate based inhibitors of HIV-1 protease"Bioorg.Med.Chem.Lett.. 12(24). 3615-3617 (2002)

S. Rajesh 等人：“Na^α-保护的-L-四氢呋喃甘氨酸的便捷合成及其在合成新型 HIV-1 蛋白酶底物抑制剂中的应用”Bioorg.Med.Chem.Lett.. 12(24) ）3615-3617（2002）。

Hikaru Matsumoto, Youhe Sohma, Tooru Kimura, Yoshio Hayashi, Yoshiaki Kiso: "Controlled drug release : new water-soluble prodrugs of an HIV protease inhibitor"Bioorg. Med. Chem. Lett.. 11(4). 605-609 (2001)

Hikaru Matsumoto、Youhe Sohma、Tooru Kimura、Yoshio Hayashi、Yoshiaki Kiso：“控制药物释放：HIV 蛋白酶抑制剂的新型水溶性前药”Bioorg。

Ei'Ichi Ami: "Synthesis of novel amino acid, L-bis-tetrahydrofuranylglycines"Tetrahedron Letters. 43・16. 2931-2934 (2002)

EiIchi Ami：“新型氨基酸L-双四氢呋喃甘氨酸的合成”Tetrahedron Letters 43・16（2002）。