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蛋白質中の硫酸化チロシン残基の蛋白質-蛋白質相互作用における役割

蛋白质中硫酸化酪氨酸残基在蛋白质-蛋白质相互作用中的作用

基本信息

批准号：
05780432
负责人：
高木淳一
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Tokyo Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

蛋白質の翻訳後修飾のうち、リン酸化や糖鎖の付加についてはその生体内においての重要性が広く認められ、多くの研究者がその研究に従事し実験手法も豊富に開発されている。一方、蛋白質のチロシン-O-硫酸化は古くから知られた翻訳後修飾でありながら、その生理的意義はもちろん、どのくらいの種類の蛋白質に含まれているのかすらほとんどわかっていない。本研究はチロシン-O-硫酸化の生理的意義、特にその細胞外マトリックスの蛋白質の相互作用における意義を解明することを目的としておこなった。まず硫酸化チロシンに対する抗体を用いた簡便なチロシン-O-硫酸化の検出法の開発を目指したが、研究種々の抗原や免疫法を試みてみたが実用に耐えうる抗体を得ることはできなかった。そこで硫酸化チロシンを含むことが知られているV型コラーゲンに着目し、これと結合する蛋白質について解析することを先に試みた。血小板に大量に含まれるトロンボスポンジン(TSP)がV型コラーゲンに結合する際の機能ドメインを決定した結果、分子量19-kDaのフラグメントにV型コラーゲンへの結合のみならず、硫酸化多糖であるヘパリンヘの結合能もあることがわかった。そしてTSPとこの19-kDaのフラグメントが硫酸化チロシンにも結合することをアルブミンに結合させた硫酸化チロシンを用いて明らかにした。この発見は硫酸化チロシンを認識する細胞外マトリックスのメカニズムが存在することを示唆しており、さらに硫酸化チロシン認識部位を短いアミノ酸配列に狭めることができれば、上記の抗体の代わりに硫酸化チロシン検出に役立てることもできるのではないかと考える。

The importance of protein post-translational modification, acidification, and the addition of sugar chains in vivo has been recognized by many researchers. The biological significance of the protein is that it contains the protein of the type. The purpose of this study is to clarify the physiological significance of O-sulfation and the specific extracellular protein interaction. The development of sulfated antibodies and the development of antigen-based immunoassays are discussed. For example, if you want to know more about the sulfated protein, you should try to analyze it. Platelet contains a large number of protein molecules (TSP), which determine the binding energy of V-type protein molecules. The molecular weight of TSP is 19-kDa. The binding energy of V-type protein molecules and sulfated polysaccharide molecules is determined. The 19-kDa protein was used to synthesize thionated protein. The discovery of the sulfated protein recognition site in the extracellular matrix exists, and the discovery of the sulfated protein recognition site is a short process of acid alignment. The discovery of the sulfated protein recognition site is a short process of acid alignment. The discovery of the sulfated protein recognition site in the antibody generation site is a short process of acid alignment.