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高等生物におけるcAMPの細胞外メッセンジャーとしての役割の解明

阐明 cAMP 作为高等生物细胞外信使的作用

基本信息

批准号：
06858076
负责人：
高木淳一
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Tokyo Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

申請者はこれまでの血小板や種々の培養動物細胞を用いた研究の過程で、アラキドン酸の代謝産物であるある脂質が培養繊維芽細胞においてアデニレートシクラーゼを強く抑制することを発見した。そしてその作用機序を検討して行くうち、細胞が作ったcAMPがほとんど細胞外に出されていることに気付いた。cAMPの生理的意義についてはこれまで多大の研究がなされ、細胞内セカンドメッセンジャーということでその役割はすっかり解明された観があるが、細胞外に積極的に排出されるcAMPの生理的意義に関してはこれまで全く省みられていない。本研究はcAMPが粘菌以外の生物においても細胞外で何らかのシグナル伝達分子として機能しているのではないかという仮説の元に、cAMPの各種細胞への作用を今一度詳細に検討することを目指してはじめた。アラキドン酸の代謝産物である12-hydroxyeicosatetraenoic acid(12-HETE)が培養繊維芽細胞においてcAMPの細胞外への放出を強く抑制することを発見していたので、まずこの12-HETEの作用を詳細に検討することから始めた。培養繊維芽細胞をPGE_1等のアゴニストで刺激するとcAMPが産生されると同時に細胞外にそのほとんどが排出される。これにたいして、アデニレートシクラーゼを直接活性化するフォルスコリンで刺激したときにはあまり細胞外には排出されなかった。そしてこのときのcAMPの産生には12-HETEはあまり影響を与えなかった。さらに、細胞を破砕して得た膜分画を用いて同様な実験を行ったところ、12-HETEは影響を持たず、12-HETEがアデニレートシクラーゼを直接に阻害しているのではないことがわかった。つまり12-HETEは酵素活性そのものと言うより,cAMPの細胞外への排出機構のどこかを阻害している可能性がある。よって12-HETEをプローブとしてcAMPの排出とその意義をいろいろな細胞で調べることができれば本研究の目的をさらに進めることができると思われる。

The applicant did a lot of research on the process of platelet culture, the process of platelet culture and the process of platelet culture. The mechanism of action of the cAMP, the cell, the cell and the cell. The meaning of cAMP physiology, the meaning of cAMP, the meaning of physiology, intracellular, intracellular, extracellular, physiological, extracellular, and extracellular. In this study, in addition to cAMP slime molds, how to detect extracellular DNA in order to reach the molecular level? the molecular mechanism can be used to determine the effects of various kinds of cells, such as cAMP, the cell cycle, the cell cycle, and the cell cycle. The acid substitutes 12-hydroxyeicosatetraenoic acid (12-HETE) were used to maintain the germ cells. The cAMP cells exhibited a strong inhibition effect on the growth of the cells. The effects of 12-HETE on the growth of the cells were similar. Culture and maintenance of germ cells, such as PGE_1, are required to stimulate the production of cAMP cells. At the same time, the extracellular cycle is activated and the cells are excreted. In the first place, there was no obvious difference between the two groups. I don't know what to do. I don't know what to cAMP. I don't know. 12-HETE. In this paper, we use the same method to make sure that the film is separated, the 12-HETE image is displayed in the same way, and the 12-HETE image is displayed in the image. The enzyme activity of 12-HETE was detected, and the extracellular enzyme excretion mechanism of cAMP was used to block the possibility of damage. The purpose of this study is to improve the quality of the study. The purpose of this study is to improve the quality of this study. The purpose of this study is to improve the cAMP.