高等生物におけるcAMPの細胞外メッセンジャーとしての役割の解明
阐明 cAMP 作为高等生物细胞外信使的作用
基本信息
- 批准号:06858076
- 负责人:
- 金额:$ 0.64万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
- 财政年份:1994
- 资助国家:日本
- 起止时间:1994 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
申請者はこれまでの血小板や種々の培養動物細胞を用いた研究の過程で、アラキドン酸の代謝産物であるある脂質が培養繊維芽細胞においてアデニレートシクラーゼを強く抑制することを発見した。そしてその作用機序を検討して行くうち、細胞が作ったcAMPがほとんど細胞外に出されていることに気付いた。cAMPの生理的意義についてはこれまで多大の研究がなされ、細胞内セカンドメッセンジャーということでその役割はすっかり解明された観があるが、細胞外に積極的に排出されるcAMPの生理的意義に関してはこれまで全く省みられていない。本研究はcAMPが粘菌以外の生物においても細胞外で何らかのシグナル伝達分子として機能しているのではないかという仮説の元に、cAMPの各種細胞への作用を今一度詳細に検討することを目指してはじめた。アラキドン酸の代謝産物である12-hydroxyeicosatetraenoic acid(12-HETE)が培養繊維芽細胞においてcAMPの細胞外への放出を強く抑制することを発見していたので、まずこの12-HETEの作用を詳細に検討することから始めた。培養繊維芽細胞をPGE_1等のアゴニストで刺激するとcAMPが産生されると同時に細胞外にそのほとんどが排出される。これにたいして、アデニレートシクラーゼを直接活性化するフォルスコリンで刺激したときにはあまり細胞外には排出されなかった。そしてこのときのcAMPの産生には12-HETEはあまり影響を与えなかった。さらに、細胞を破砕して得た膜分画を用いて同様な実験を行ったところ、12-HETEは影響を持たず、12-HETEがアデニレートシクラーゼを直接に阻害しているのではないことがわかった。つまり12-HETEは酵素活性そのものと言うより,cAMPの細胞外への排出機構のどこかを阻害している可能性がある。よって12-HETEをプローブとしてcAMPの排出とその意義をいろいろな細胞で調べることができれば本研究の目的をさらに進めることができると思われる。
Applicants は こ れ ま で の platelet や kind 々 を の culture of animal cells with い で の た research process, ア ラ キ ド の ン acid metabolites で あ る あ る lipid が に culture 繊 d bud cells お い て ア デ ニ レ ー ト シ ク ラ ー ゼ を strong く inhibit す る こ と を 発 see し た. そ し て そ の function machine sequence を beg し 検 て line く う ち, cell が っ た cAMP が ほ と ん ど extracellular に out さ れ て い る こ と に 気 pay い た. CAMP の physiological significance に つ い て は こ れ ま で の much research が な さ れ, intracellular セ カ ン ド メ ッ セ ン ジ ャ ー と い う こ と で そ の service cut は す っ か り interpret さ れ た 観 が あ る が, extracellular に positive に discharge さ れ る cAMP の physiological significance に masato し て は こ れ ま で く provinces み ら れ て い な い. This study は cAMP が outside の biological slime mold に お い て も extracellular で what ら か の シ グ ナ ル 伝 operatives と し て function し て い る の で は な い か と い う 仮 said の yuan に, cAMP の various cell へ の role を for detailed に beg す 検 る こ と を refers し て は じ め た. Youdaoplaceholder0 <s:1> acid metabolite である12-hydroxyeicosatetraenoic Acid (12 - HETE) が に culture 繊 d bud cells お い て cAMP の extracellular へ の emit strong を く inhibit す る こ と を 発 see し て い た の で, ま ず こ の 12 - HETE の role を detailed に beg す 検 る こ と か ら beginning め た. Cultivate 繊 d bud cells を PGE_1 etc. の ア ゴ ニ ス ト で stimulus す る と cAMP が produce さ れ る と also に extracellular に そ の ほ と ん ど が discharge さ れ る. こ れ に た い し て, ア デ ニ レ ー ト シ ク ラ ー ゼ を directly activeness す る フ ォ ル ス コ リ ン で stimulus し た と き に は あ ま り extracellular に は discharge さ れ な か っ た. Youdaoplaceholder0 て て えな と と と と cAMP そ produces に に 12-HETE あま あま effects を and えな った った. さ ら に, cell を 砕 し て た membrane points を used い て with others な be 験 を line っ た と こ ろ, 12 - HETE は influence を hold た ず, 12 - HETE が ア デ ニ レ ー ト シ ク ラ ー ゼ を directly に resistance against し て い る の で は な い こ と が わ か っ た. つ ま り 12 - HETE は enzyme activity そ の も の と said う よ り, cAMP の extracellular へ の eduction institutions の ど こ か を resistance against し て い る possibility が あ る. よ っ て 12 - HETE を プ ロ ー ブ と し て cAMP の discharge と そ の meaning を い ろ い ろ な cells で adjustable べ る こ と が で き れ ば の purpose this study を さ ら に into め る こ と が で き る と think わ れ る.
项目成果
期刊论文数量(1)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Takagi,et al.: "β1-integrin mediated adhesion of melanoma cells to the propolypeptide of von Willebrand factor" European Journal of Biochemistry. 222. 861-867 (1994)
Takagi 等人:“β1-整合素介导的黑色素瘤细胞与冯维勒布兰德因子的前多肽的粘附”欧洲生物化学杂志 222. 861-867 (1994)。
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