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IPRの前処理による耳下腺GTP結合蛋白質の動態とアミラーゼ分泌

IPR预处理对腮腺GTP结合蛋白和淀粉酶分泌的动态影响

基本信息

批准号：
05857204
负责人：
天野伊知郎
金额：
$ 0.58万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

beta-作動薬であるイソプロテレノール(IPR)で10あるいは30分間の前処理を加えた場合にラット耳下腺からの同濃度のIPRによるアミラーゼ(A)分泌にそれぞれ見られるSuopersensitivity(S)あるいはDesensitization(D)の機序をbeta-受容体・アデニル酸シクラーゼ系の共役因子であるGTP結合蛋白質の動態との関連において追究し、下記の成果を得た。(1)耳下腺細胞膜のGTP結合能を[^<35>S]GTPgammaSを用いた結合実験で調べると、IPRによるA分泌にSが見られる時にはアデニル酸シクラーゼに対して抑制性に作用するGi蛋白質(Gi)のGTPとの結合能が対照に比して低下し、逆にA分泌にDがみられる時にはGiのGTPとの結合能が対照に比して増大していた。アデニル酸シクラーゼに対して促進性に作用するGs蛋白質(Gs)のGTPとの結合能はA分泌のSおよびD時にともに対照に比して変化は見られなかった。(2)耳下腺細胞膜のGTP結合蛋白質のADP-リボシル化能の変動とA分泌のSあるいはDとの関連性を調べると、GiのADP-リボシル化能はA分泌のS時に対照に比して低下し、D時に対照に比して増加していることが示された。GsのADP-リボシル化能にはA分泌のSおよびD時ともに対照に比して変動は見られなかった。(3)耳下腺からのA分泌にSあるいはDがみられる条件下で調整した耳下腺細胞膜蛋白質をプロテインキナーゼA(PKA)の存在下でりん酸化した後、GTP結合蛋白質とくにGiのADP・リボシル化能の変動を調べた。その結果、A分泌のD時にみられたGiのADP-リボシル化能の増大は全く認められず、対照に比して差異は認められなかった。また、A分泌のS時にみられたGiのADP-リボシル化能の抑制はりん酸化の影響を受けなかった。(4)耳下腺細胞膜蛋白質をアルカリホスファターゼで脱りん酸化した後、GiをADP-リボシル化能を調べると、脱りん酸化の程度に応じてADP-リボシル化能は著しく増強された。従って、本研究においてbeta-受容体を介する耳下腺腺房細胞の応答にGiの機能の変動、とくにこの蛋白質のリン酸レベルの変動によるADP-リボシル化能の変動が密接に連関してることが明らかにされた。

The mechanism of beta-receptor (S) and Desensitization(D) was investigated. The results were obtained by investigating the dynamics and correlation of GTP-binding proteins in the beta-receptor system. (1)GTP binding energy of auricular gland <35>cell membrane is regulated by GTPgammaS, and GTPgammaS binding energy of Gi protein (Gi) is increased by GTPgammaS binding energy of Gi protein (Gi) when GTPgammaS binding energy of auricular gland cell membrane is decreased by GTPgammaS binding energy, and GTPgammaS binding energy of Gi protein (Gi) is increased by GTPgammaS binding energy of Gi protein (Gi) when GTPgammaS binding energy of auricular gland cell membrane is decreased by GTPgammaS binding energy, and GTPgammaS binding energy of Gi protein (Gi) is increased by GTPgammaS binding energy of Gi protein (Gi). The binding energy of GTP to G protein (Gs) is enhanced when G protein is secreted. (2)The relationship between ADP-binding protein activity and A secretion in auricular gland cell membrane and A secretion in auricular gland cell membrane was studied. The ADP-1 gene expression is related to the A gene expression and D gene expression. (3)In the presence of pKA, GTP-binding protein and Gi ADP are regulated in the auricular gland cell membrane. The results of A secretion are as follows: The secretion of A and A is affected by the inhibition of ADP-1 and ADP-2. (4)Aural gland cell membrane proteins are regulated by ADP-dependent enzymes, and the activity of ADP-dependent enzymes is enhanced. In this study, the function of Gi and ADP-receptor in the response of auricular gland cells mediated by beta-receptor are closely related to the function of ADP-receptor in the response of auricular gland cells.