肝細胞増殖因子活性化活性化酵素(HGFactivator)の肝障害時の機能に関する研究

肝细胞生长因子激活酶(HGFactivator)在肝损伤过程中的作用研究

• 批准号: 06772167
• 负责人: 宮澤 恵二
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Kansai Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06772167/
• 关键词: 肝細胞増殖因子; HGF activator; プロセシング; 肝障害

肝細胞増殖因子(HGF)は、肝障害後の肝再生に重要な役割を果たすと考えられている増殖因子である。昨年度までの研究によりHGFは正常肝では一本鎖前駆体(不活性型)として分泌されるが、障害肝ではプロセシングされて二本鎖型(活性型)に変換されることを見い出している。また、HGFを二本鎖型に活性化する新規のセリンプロテアーゼをヒト血清より精製し、肝細胞増殖因子活性化酵素(HGFactivator;HGFA)と命名した。本研究では、肝障害に応答したHGFの活性化にHGFAがいかに関与するかについて、ラットを実験動物として解析した。ラット血清からHGFAを精製し、ヒト由来のHGFAと同様の性質(比活性・阻害剤感受性)を持つことを確認した。この標品を用いてヒトHGFAに対する8種類のモノクローナル抗体との反応性を検討し、酵素活性を中和する抗体(p1-4)、および還元条件下でのイムノ・ブロッティングに使用可能な抗体(A-1)を見いだした。HGFAは血漿中などでは96kDaの不活性型、また血清中ではおもに34kDaの活性型として存在する。正常および障害肝におけるHGFAの存在状態を検討するため、臓器抽出液からP1-4固定化抗体カラムによりHGFAを部分精製し、イムノ・ブロッティングにより解析した。肝障害のラットの肝臓からはHGFAの活性型が検出されたが、正常ラットおよび腎障害ラットの肝臓からは検出されなかった。この事実はHGFAが障害肝におけうHGFの活性化に関与する可能性を強く示唆する。実際、障害肝のホモジェネートにはHGFを活性化する酵素活性が誘導されるが、上述のP1-4抗体によりこの活性が80%以上阻害された。したがってHGFAは、障害肝においてHGFを活性化するキ-・エンザイムであることが明らかになった。

Hepatocyte growth factor (HGF) plays an important role in liver regeneration after liver injury. In the past year, HGF has been studied in normal liver, but it has been found to be secreted from a locked precursor (inactive form) to a locked precursor (active form). HGF is a new enzyme for the activation of hepatocyte growth factor (HGF). In this study, the activation of HGF in liver dysfunction was analyzed. HGFA is purified from serum, and its origin and properties (specific activity and resistance) are confirmed. This standard is used to detect 8 kinds of antibodies and their reactivity, enzyme activity neutralizing antibodies (p1-4), and possible antibodies (A-1) under reductive conditions. HGFA is present in the inactive form of 96kDa in plasma and in the active form of 34kDa in serum. The presence of HGFA in normal and impaired liver tissues was investigated, and HGFA was partially purified and analyzed from P1-4 immobilized antibody extracts. HGFA activity is detected in the liver, kidney, and kidney. This is a strong indication of the possibility that HGFA could harm the liver and activate HGF. In fact, the activity of an enzyme that activates HGF is induced in liver-damaging organisms, and the above-mentioned P1-4 antibody inhibits this activity by more than 80%. HGFA is not only harmful to human beings, but also harmful to human beings.

项目成果

S.Shibamoto: "Association of p120,a tyrosine kinase substrate, with E-cadherin/catenin complexes." J.Cell Biol.(in press). (1995)

S.Shibamoto：“p120（一种酪氨酸激酶底物）与 E-钙粘蛋白/连环蛋白复合物的关联。”

T.Shimomura: "Activation of hepatocyte growth factor by two homologous proteases:blood coagulation factor XIIa and hepatocyte growth factor activator." Eur.J.Biochem.(in press). (1995)

T.Shimomura：“两种同源蛋白酶激活肝细胞生长因子：凝血因子 XIIa 和肝细胞生长因子激活剂。”