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イノシトールリン脂質の分子種特異的生合成機構と情報伝達系への関与

肌醇磷脂分子物种特异性生物合成机制及其参与信号转导系统

基本信息

批准号：
06780513
负责人：
山下純
金额：
$ 0.51万
依托单位：
Teikyo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

イノシトールリン脂質の脂肪酸リモデリング系に関与する酵素を分子レベルで理解することを目的として、アシルCoA:リゾホスファチジルイノシトール(リゾPI)アシルトランスフェラーゼを膜から可溶化し、分離精製をおこなった。本酵素を含めリゾリン脂質アシルトランスフェラーゼ系酵素は界面活性剤により強く阻害されるため、これまで可溶化や精製は困難であったが、両イオン性界面活性剤のCHAPSを用いラット肝臓ミクロソームから酵素の失活なく可溶化することに成功した。さらに可溶化画分をカラムクロマトグラフィーを用いて分離精製を行い、リゾホスフアチジルコリンアシルトランスフェラーゼ活性とリゾPIアシルトランスフェラーゼ活性を分離することができた。また、リゾPIのsn-1位に脂肪酸を導入する酵素とsn-2位に導入する酵素も分離することができ、リゾリン脂質アシルトランスフェラーゼに、リゾリ脂質の種類や脂肪酸の導入位置を異にする数種類の酵素が存在することが示された。1-アシルリゾPIを基質とするアシルトランスフェラーゼの部分精製標品を用い性質を検討した。アシルCoAに対する特異性は酵素が存在する状態により変化し、リン脂質の存在時には(ミクロソームでの状態に比較的近い)、アラキドニルCoAに対する活性が最も高いことが明かになった。このことは肝臓に、2-アラキドニルPIが多量に存在するという事実を説明でき、リゾPIアシルトランスフェラーゼがPIのリモデリング系、分子種特異的生合成に関与することが強く示唆された。また、部分精製標品はアシルトランスフェラーゼの逆反応の活性も存在し、CoA依存的にPIを分解しうることが示された。PIは種々の情報伝達系に関与することより、本酵素によるCoA依存的なPIの分解が、多くの細胞機能を変化させることが考えられた。本酵素によりアシルCoAが同時に産生することより、アシルCoA依存性酵素の活性調節にも関与することが考えられた。

The fatty acid chain of lipids is related to the enzyme molecular chain. The purpose of the chain is to dissolve and purify the fatty acid chain of lipids. The enzyme contains a lipid profile and is successfully solubilized by CHAPS, which is an active surfactant and difficult to purify. In addition, the solubility of the solvent is determined by the separation and refinement of the solvent. The separation and refinement of the solvent are determined by the separation and purification of the solvent. The enzyme introduced into sn-1 position of PI and sn-2 position of PI was isolated. The type of lipid and the position of introduction of fatty acid were different. 1. The properties of some of the refined samples are discussed. The activity of CoA is the highest in the presence of enzymes and lipids. This is a description of the relationship between the existence of 2-amino-2-amino-2-hydroxy-2-methyl-PI and the existence of multiple amino-2-hydroxy-2-methyl-PI. It is a description of the relationship between the existence of 2-amino-2-hydroxy-2-methyl-PI and the existence of multiple amino-2-hydroxy-2-methyl-PI. Some of the refined products are labeled as CoA-dependent PI. PI is related to the information transmission system, and this enzyme is related to the decomposition of PI, and the transformation of multiple cellular functions. This enzyme is involved in the regulation of CoA activity.