O^-_2産生における新規39kDaタンパク質の役割

一种新型 39kDa 蛋白质在 O^-_2 生产中的作用

• 批准号: 06770111
• 负责人: 染谷 明正
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770111/
• 关键词: NADPH oxidase; 活性酸素; 好中球; 細胞質因子

白血球の活性酸素(O^-_2)産生は、NADPH oxidaseの活性化により生じる。この酵素は複数の成分で構成されており、白血球が刺激されると細胞質成分であるp47^<phox>,p67^<phox>が細胞膜に移行し、膜成分であるcytochrome b_<558>と会合することでO^-_2が産生される。我々は最近p47^<phox>,p67^<phox>と複合体を形成している39kDaタンパク質を発見した。そこで本研究では、この39kDaタンパク質のO^-_2産生における役割について検討した。まず、p47^<phox>,p67^<phox>および39kDaタンパク質の複合体を、界面活性剤の存在下でクロマトグラフィーを行なった。その結果、39kDaタンパク質はp47^<phox>と解離したが、p67^<phox>とは解離しなかったことから、39kDaタンパク質はp67^<phox>と強く会合していることがわかった。次に、39kDaタンパク質の部分アミノ酸配列をもとに作製したペプチド抗体を用いて39kDaタンパク質の挙動を調べたところ、刺激剤を添加することにより39kDaタンパク質がp67^<phox>から解離することが観察された。さらに、刺激による細胞質タンパクの膜への移行とその時のO^-_2産生能を比較したところ、39kDaのタンパク質はp67^<phox>よりもp47^<phox>と一致して膜に移行し、その時のO^-_2産生は、39kDaタンパク質とp47^<phox>の膜への移動と一致することがわかった。さらに、好酸球についても検討したところ、同様の結果が得られた。これらの結果から、39kDaタンパク質は、休止時にp67^<phox>と会合して存在するが、刺激されるとp67^<phox>と解離し、むしろp47^<phox>と共に膜へ移行することによって、スーパーオキシド生成を調節する食細胞(好中球、好酸球)に普遍的な因子であることが考えられた。なお、ヒト白血病細胞株HL-60を用いて、細胞分化に伴う39kDaタンパク質の発現の変化を調べるとともに、慢性肉芽腫症患者の好中球について、39kDaタンパク質が欠損しているかどうかを今後検討していきたい。

White blood cells produce によ of active acid (O^-_2), によ of NADPH oxidase によ and じる. は こ の enzyme complex の composition で constitute さ れ て お り, white blood cells が stimulation さ れ る と cytoplasm components で あ る p47 ^ < phox >, p67 ^ < phox > が membrane に transitional し, membrane composition で あ る cytochrome b_ < 558 > meet と す る こ と で O ^ - _2 が produce さ れ る. Recently I 々 は p47 ^ < phox >, p67 ^ < phox > と complex を form し て い る 39 kda タ ン パ ク qualitative を 発 see し た. そ こ で this study で は, こ の 39 kda タ ン パ ク production の O ^ - _2 に お け る service cut に つ い て beg し 検 た. ま ず, p47 ^ < phox >, p67 ^ < phox > お よ び 39 kda タ ン パ ク qualitative の complex を, interfacial active presence of tonic の で ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー を line な っ た. そ の results, 39 kda タ ン パ ク qualitative は p47 ^ < phox > と dissociation し た が, p67 ^ < phox > と は dissociation し な か っ た こ と か ら, 39 kda タ ン パ ク qualitative は p67 ^ < phox > meet strong と く し て い る こ と が わ か っ た. Time に, 39 kda タ ン パ ク qualitative の part ア ミ ノ acid with column を も と に cropping し た ペ プ チ を ド antibody with い て 39 kda タ ン パ ク qualitative の 挙 motion を べ た と こ ろ, stimulant を add す る こ と に よ り 39 kda タ ン パ ク qualitative が p67 ^ < phox > か ら dissociation す る こ と が 観 examine さ れ た. さ ら に, stimulating に よ る cytoplasm タ ン パ ク の membrane へ の transitional と そ の の O ^ - _2 could produce を し た と こ ろ, 39 kda の タ ン パ ク qualitative は p67 ^ < phox > よ り も p47 ^ < phox > と consistent し て membrane に transitional し, そ の の O ^ - _2 は, 39 kda タ ン パ ク qualitative と p47 ^ < p hox> <s:1> membrane へ <s:1> movement と consistency する とがわ とがわ った. Youdaoplaceholder0, a good acid ball に さらに て て 検 検 to ask for たと たと ろ ろ ろ, the same <s:1> result が to get られた. こ れ ら の results か ら, 39 kda タ ン パ ク は, when resting に p67 ^ < phox > meet と し て exist す る が, stimulating さ れ る と p67 ^ < phox > し と dissociation, む し ろ p47 ^ < phox > と に membranes へ transitional す る こ と に よ っ て, ス ー パ ー オ キ シ ド generated を adjust す る food cells (ball, good good (acid ball)に universal な factor である である とが test えられた. な お, ヒ ト leukemia cell line HL 60 を with い て and cell differentiation に う 39 kda タ ン パ ク qualitative の 発 の now - the を adjustable べ る と と も に, の good in patients with chronic granulomatous disease に つ い て, 39 kda タ ン パ ク qualitative が owe loss し て い る か ど う か を 検 for future し て い き た い.