HIV-1の初期複製におけるトポイソメラーゼ活性の関与

拓扑异构酶活性参与 HIV-1 的早期复制

• 批准号: 06770180
• 负责人: 高橋 秀宗
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: 国立予防衛生研究所
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770180/
• 关键词: Topoisomerase I活性化; HIV-1初期複製; ウイルス宿主相互作用; レトロウイルスの複製

AIDSの原因ウイルスであるHIV-1複製の研究は逆転写酵素の発見以来、蓄積されたレトロウイルスの研究成果により短期間のうちに多くのことかが明らかとなった。しかし宿主の状態にその複製が大きく左右されることを説明するための機構など、宿主側因子との相互作用についての研究が大きく遅れていると考えられる。本研究においては、ウイルスgag蛋白が宿主に発現された時に宿主の酵素として知られているtopoisomerase I(topo I)様の活性が認められることを発端とし、ウイルス複製における宿主因子との相互作用を分子生物学的に明確にすることを目的とした。即ち、ワクシニアによって発現させたgag蛋白を免疫沈降したところ、その沈降物にスーパーコイル型DNAに対する弛緩活性が見い出された。この活性はtopo Iの特異的な阻害剤であるcaptothecinによって濃度依存的に阻害された。さらにこの活性がgag蛋白によるものであるか宿主topo Iとの関係によるものかを調べるために大腸菌によって発現させたgag蛋白と精製topo Iを用意した。予想どうりgag蛋白自体に活性は認められず、gag蛋白は精製topo Iの活性をその濃度依存性に上昇させることが判明した。さらに、この相互作用が実際の感染系において示す役割を解析するために、topo Iの阻害剤であるcaptothecinをHIV-1の感染時に加え、DNA合成をサザンブロット法にてモニターした。その結果、阻害剤の濃度に依存して、プロウイルスの合成が減少していることが判明した。以上の結果は、HIV-1の複製においてウイルスgag蛋白が、宿主topoisomerasa Iとの相互作用により、プロウイルス合成以前という初期複製段階に深く関与することを示していると考えられた。同時に今後さらに詳細な相互作用の解析が、レトロウイルスとHIV-1の複製機構の解明に必要であると考えられる。

AIDS cause study on HIV-1 replication. Since the enzyme was written in reverse, the results of the study have been collected. In this paper, the status of the host is used to copy the information about the mechanism, the interaction between the host and the host, the interaction between the host and the host. The purpose of this study is to detect the molecular biology of gag protein interaction between host enzymes and topoisomerase I (topo I), and to copy the molecular biology of host factor interaction. In other words, gag protein was detected by immuno-sedimentation, DNA protein was detected by immuno-sedimentation, and DNA protein was expressed by immunoassay. "active" topo I special "block"captothecin"block" is a degree-dependent "block". The gag protein is active. The host topo I protein is active. The host topo I protein is the host. The host protein is topo I protein. It is expected that the autologous activity of gag protein and the activity of gag protein can be identified by topo I activity and degree dependence. The interaction between topo and HIV-1 was detected by Elisa, topo I was used to prevent HIV-1 infection, and HIV-1 infection was detected by the method of synthesis of HIV. The results, the degree of resistance, the degree of dependence, the synthesis of the results, the results of the results, the degree of dependence and the accuracy of the results. The results of the above results, HIV-1 replication, gag protein, host topoisomerasa I interaction, host interaction, pre-synthesis, early stage of synthesis, and the depth and depth of the early stage of synthesis show that there is a significant difference between the two groups. At the same time, in the future, we need to analyze the interaction between HIV-1 and HIV-1. In the meantime, we need to analyze the interaction between HIV-1 and HIV-1.