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HIV-1,gag蛋白依存性に活性化される宿主トポイソメラーゼIのはたらき

宿主拓扑异构酶 I 以 HIV-1、gag 蛋白依赖性方式激活的功能

基本信息

批准号：
07770173
负责人：
高橋秀宗
金额：
$ 0.64万
依托单位：
国立予防衛生研究所
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

これまでの研究によってHIV-1ウイルスの構造蛋白であるgag蛋白がtopoisomerase Iを活性化することを明らかにした。本研究においてはこのgag蛋白による宿主topoisomerase Iの活性化がウイルス複製のどの段階で関わっているかを明らかにすることを目的とした。具体的には以下の方法を取った。1。HIV-1の部分的なゲノムをT7 polymeraseによって産出するプラスミドを構築後、in vitroでRNAを転写しテンプレイトを準備する。2。1。を用いたin vitro逆転写系を準備する。3。2。のin vitro逆転写系において組み替えgag蛋白、topoisomerase I等のもたらす影響を調べる。その結果、両端にLTRを有し中央部gag-pol-envを除去した1本鎖HIV-1 RNAをテンプレートととし、標識したプライマー、市販精製RTを用いた逆転写反応において、GST-p15で活性化されたtopo Iを添加すると、濃度依存的にcDNA生成量が増加した。一方、このcDNA合成量はtopo I阻害剤であるカンプトテシンによって濃度依存的に減少した。本研究ではウイルスgag蛋白と宿主topoIの相互作用について、さらに理解を深めるためにHIV-1 RNAゲノムのin vitro複製モデル系を構築し、活性化topo Iの作用を検討した。その結果topo Iは逆転写効率をウイルスgag蛋白との関連により上昇させることが明らかになり、レトロウイルスの複製に一般化することができる可能性のある機構があきらかとなった。

HIV-1 protein, topoisomerase I, activation protein, protein. In this study, gag protein was used to activate the host topoisomerase I protein. In this study, the host topoisomerase I protein was activated and the host topoisomerase I was activated. The following specific methods are used to select information. one. In the HIV-1 section, the in vitro RNA will write after the T7 polymerase file is ready to get ready. two. one. Write "prepare" with "in vitro inverse". three. two. In vitro reverse writing system is used to replace gag protein, topoisomerase I and other proteins. The results show that in the end of the LTR, there is a central part of the gag-pol-env that removes the data from the HIV-1 RNA, the tags, the headers, the RT, the GST-p15, the topo I, and the degree-dependent cDNA. On the one hand, the amount of cDNA synthesis topo I block the number of factors that depend on the degree of dependence. In this study, gag protein host topoI interactions, interactions, in vitro replication, in vitro replication, and activation of topoI interactions were studied. The results showed that the topo I reverse write rate, gag protein, protein and protein.