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HIV-1複製に関わる新たな宿主因子の解明

阐明参与 HIV-1 复制的新宿主因子

基本信息

批准号：
09258228
负责人：
高橋秀宗
金额：
$ 1.6万
依托单位：
国立予防衛生研究所
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

HIV-1複製過程の詳細な解析のために、宿主因子による制御機構を解析することを目的とした。実験系として、精製したHIV-1へ基質を加え、ゲノムRNAのDNAへの逆転写を直接アッセイする系(endogenous reverse transcription assay)を用いた。この系へtopoisomerase I以外にRNA heicase等を介し逆転写へ関与することが予想されるATP等ヌクレオチドを添加し、逆転写を制御する機構を解析した。またバキュロウイルスによって宿主因子topoisomerase Iを発現させ、精製し、上記アッセイ系における影響を調べ、以下の結果が得られた。1)ATP及びその非加水分解性のアナログATP-γSによって,濃度依存的に精製HIV-1ウイルスの逆転写効率が上昇することが判明した。2)精製topoisomerase IをHIV-1ウイルスサンプルへ加えたところ、濃度依存的に逆転写効率が上昇した。3)さらにATPを加えると濃度依存性に活性を上昇させることが出来た。以上より、ATPへ結合する因子によって逆転写効率が著明に上昇させることが出来た。以上より、ATPへ結合する因子によって逆転写効率が著明に上昇することが判明した。同じ系においてウイルス量を減らし精製topoisomerase Iを加えることによってATPの作用が更に著明になったことからATPの標的はウイルス中に含まれるtopoisomerase Iであることが強く示唆された。ATPによってHIV-1の逆転写が調節されていることが判明したが、この分子機構はウイルスへ取り込まれている宿主因子topoisomerase IとATPとの結合によって説明されうると考えられた。

The HIV-1 replication process is used to analyze the data, and the host factor is used to analyze the purpose of the system. Please use the following words: HIV-1, RNA, DNA, endogenous reverse transcription assay, etc. In addition to topoisomerase I, RNA heicase and other information systems are required to make sure that you want to use ATP and other information systems to add information and reverse data to the system and control system. This is the main reason why the host factor, topoisomerase I, has been detected, refined, and the previous host factor is affected. The following results show good results. 1) ATP and non-hydrolytic drugs, which are not hydrolyzed, are sensitive to HIV-1-γ SMA, which are degree-dependent. 2) the accuracy of topoisomerase I