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血清を用いたカリニ肺炎の診断と治療経過判定の検討

卡氏肺炎的血清诊断及治疗进展评估

基本信息

批准号：
06770333
负责人：
安岡彰
金额：
$ 0.58万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770333/
关键词：
ニューモシスチスカリニ β-グルカン血清診断 PCR

项目摘要

1.(1→3)-β-D-glucanの検出。Pneumocystis carinii(以下P.carinii)のcystには(1→3)-β-D-glucan(以下β-glucan)が存在するが、これが血清から検出されるか否かの検討の報告はない。そこで、真菌のβ-glucan検出キットとして開発されているG-test(生化学工業)を用いてP.cariniiのβ-glucanの測定を行った。(1)本キットによりP.cariniiからβ-glucanが検出されることの証明。ヌードマウスをP.cariniiの既感染マウスと同一環境内で飼育することにより、約16週で明らかな感染が成立した。このマウスの肺胞洗浄液からは平均2600ng/mlのβ-glucanが検出されたが、対照マウスの洗浄液では平均7ng/mlであった。このあきらかな上昇は、P.carinii由来と考えられ、G-testでP.cariniiのβ-glucanが検出できることが確認された。(2)ヒト血清での検討。東京大学医科学研究所附属病院でカリニ肺炎の確定診断がなされた8名の患者のうち7名の血清から、平均494ng/mlと高値のβ-glucanが検出された。対照患者ではすべて10ng/ml以下であり、カリニ肺炎患者の血清からβ-glucanが検出されることがあきらかとなった。また、治療経過に伴い、β-glucan値も変動が見られ、経過判定にも有効であると考えられた。2.血清からのPCRによるカリニ遺伝子の検出。血清を用いてPCRを行う場合には、その中に含まれる阻害因子の影響を考慮する必要がある。一方、検討対象は肺炎であり、菌血症の病原体を検出する場合と異なり、血清中の病原体遺伝子は存在してもきわめて微量であることが推定され、ある程度の検体量が必要であると考えられる。これまでの検討によれば、1PCR反応に対して血清5μl以上を使用すると増幅が阻害される。現在この点を改良すべく検討を継続している。

1. (1→3)-β-D-glucan was detected. The cyst of Pneumocystis carinii(hereinafter P.carinii) is (1→3)-β-D-glucan(hereinafter β-glucan). G-test(biochemical industry) is used to determine the β-glucan of P. carinii. (1)This paper proves that P.carinii β-glucan Due to the fact that P. carinii was already infected with P. carinii and raised in the same environment, the infection was established approximately 16 weeks later. The average concentration of β-glucan was 2600ng/ml, while the average concentration of β-glucan was 7ng/ml. P. carinii origin, G-test, P. carinii β-glucan detection, P. carinii identification (2)The blood serum was examined. The serum samples from 7 of 8 patients with a confirmed diagnosis of Kareni pneumonia at the University of Tokyo Institute of Medical Sciences Hospital were detected, with an average of 494ng/ml and a high value of β-glucan. For patients with pneumonia, serum levels below 10ng/ml were measured.また、治疗経过に伴い、β-glucan値も変动が见られ、経过判定にも有効であると考えられた。2. Serological PCR detection of DNA. It is necessary to consider the influence of the inhibition factors in serum PCR. A party, the examination of pneumonia, the detection of pathogens in bacteremia, the presence of trace pathogens in serum, the degree of detection, the amount of detection necessary, etc. The PCR assay was performed on a sample containing more than 5μl of serum. Now the point is to improve the quality of the product.