新しい免疫電顕法によるエピリグリンの皮膚基底膜部における微細局在部位の解明

使用新的免疫电子显微镜方法阐明 epiligrin 在皮肤基底膜中的精细定位

• 批准号: 06770669
• 负责人: 石河 晃
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770669/
• 关键词: エピリグリン; 免疫電顕; 全コロイド; 皮膚基底膜; 自己抗体; 自己抗原

エピリグリンは1991年、発見された皮膚基底膜部の細胞外マトリックスであり、インテグリンのリガンドとして基底細胞と基底板の間の接着に関与していると考えられている。近年、瘢痕性類天疱瘡の患者血清中に、この物質に対する自己抗体を有するものが報告され、自己抗原の一つとして注目を集めた。今回、この患者血清を用いて凍結固定、凍結置換を用いた包埋後免疫電顕法を施行した。その結果、自己抗体の正常ヒト皮膚における結合部位は皮膚基底膜部の透明層下端部で基底板に近い部分であることが明らかとなった。その沈着はヘミデスモゾームの直下で多く観察され、エピリグリンとヘミデスモゾームの関連が示唆された。また、同じ血清を用いて正常ヒト皮膚凍結超薄切片にて免疫電顕法を施行したが、抗原性の保持はよいものの形態保持が悪く、バックグランド染色も強いため、包埋後免疫電顕法の結果以上のものは得られなかった。また、抗エピリグリンモノクローナル抗体であるGB 3を用いて同様に免疫電顕を施行したところ、やはり、皮膚基底膜部の透明層の最下端部に結合がみられ、透明層と基底板の境界部にそのエピトープが存在すると考えられた。また、抗α6インテグリン抗体であるGOH3を用いて免疫電顕を施行したところ、そのエピトープは基底細胞へミデスモゾームの細胞膜に沿って透明層の上端部に存在することが明らかとなった。以上の結果より、エピリグリンは主として透明層のヘミデスモゾーム直下に存在し、患者血清中の自己抗体の標的となり得ること、自己抗体のエピトープはGB 3抗体のエピトープと近い位置にあること、また、α6インテグリンのリガンドとして機能し得るがそのためにはエピリグリン分子は透明層を横断して存在すべきであることが推定された。

エピリグリンは 1991, 発见されたExtracellular マトリックスであり, イン in the basement membrane of the skinテグリンのリガンドとして basal cell and basal plate の间のthen pass and していると卡えられている. In recent years, there have been reports of autoantibodies and autoantigens in the serum of patients with cicatricial pemphigoid. This time, the patient's serum was freeze-fixed and frozen-replaced, and the immunoelectrode method was performed after embedding. The result of the test is that the autoantibodies are normal to the skin and the binding site is the lower end of the transparent layer of the basement membrane of the skin and the close part of the basal plate.その综合はヘミデスモゾームの正下で多く観看され,エピリグリンとヘミデスモゾームのrelated が时憆された.また、Same serum as いてNormal skin frozen ultrathin section にてimmunoassay method をimplementation したが、Antigenicity のmaintenance はよいものThe results of morphology maintenance, バックグランド staining, and post-embedding immunoelectrode staining are all the same.また、Anti-エピリグリンモノクローナルantibody であるGB 3. Use the same immunoassay method to perform the したところ, やはり, and the lower end of the transparent layer of the skin basement membrane. The combination of the part and the boundary part of the transparent layer and the base plate is the existence of the part.また, anti-α6 インテグリン antibody であるGOH3を was performed with いてimmunoelectronic acid をしたところ, そのエピトーThe basal cell membrane is present along the upper end of the transparent layer and is clearly visible. The result of the above is that the transparent layer of the エピリグリンは主としてtransparent layer スモゾームdirectly existsし, autoantibodies in the patient's serum, となり德ること, autoantibodies, のエピトープはGB 3 Antibody のエピトープとNearly い position にあること, また, α6 インテグリンのリガンドとして Function しObtain the るがそのためにはエピリグリンmolecule は transparent layer をcross して existence すべきであることが inference された.