バゾプレッシン・オキシトシンによる生体調節機序の解明-分子生物学・形態学・薬理学及び生理学的アプローチ-

バゾプレッシンおよびオキシトシンの持つ多岐にわたる生理作用のメカニズムを遺伝子レベルから行動レベルに至るまで一貫して、総合的に解析するための国際学術研究ををこなうことが本研究の目的であった。現在までに得られた成果の概要を以下に列記する。1.バゾプレッシンのアンチセンスDNAをラット脳内投与により多飲、多尿が引き起こされた。2.遺伝性多飲マウスのバゾプレッシン遺伝子の塩基配列を決定したが、異常はなかった。3.遺伝性多飲マウスのバゾプレッシンV2受容体遺伝子の塩基配列を決定したが、異常はなかった。4.遺伝性多飲マウスのバゾプレッシンおよびオキシトシンmRNAとそれぞれの脳内の局在は一致したが、バゾプレッシン遺伝子は視床下部で過剰に発現していた。5.遺伝性多飲マウスおよびコントロールマウスでバゾプレッシンV1受容体およびオキシトシン受容体の脳内分布をオートラジオグラフィー法により検討したところ、視床傍室核のバゾプレッシンV1受容体が、コントロールマウスに比べて遺伝性多飲マウスで多かった。オキシトシン受容体の脳内分布には明らかな差異はなかった。6.遺伝性多飲マウスの学習能力はコントロールマウスよりも優れていることが示唆された。7.パッチクランプ法を用いて、ラットおよびマウス脳スライス標本の視索上核の神経分泌ニューロンから電気記録を行ない、シナプス電流を解析した。また、視索上核から単離した神経分泌ニューロンを用いて、パッチクランプ法により電気記録を行った。8.カルシウム画像解析法を用いて、グルタミン酸受容体アゴニストの刺激により、単離した神経分泌ニューロンで細胞内カルシウム濃度が濃度依存性に上昇することが観察された。9.脳スライス標本の視索上核の神経分泌ニューロンからパッチクランプ法を用いた電気記録を行なうと同時に細胞内カルシウム濃度の同時測定に成功した。

バゾプレッシンおよびオキシトシンの持つ多岐にわたる生理作用のメカニズムを遺伝子レベルから行動レベルに至るまで一貫して、総合的に解析するための国際学術研究ををこなうことが本研究の目的であった。現在までに得られた成果の概要を以下に列記する。1.バゾプレッシンのアンチセンスDNAをラット脳内投与により多飲、多尿が引き起こされた。2.遺伝性多飲マウスのバゾプレッシン遺伝子の塩基配列を決定したが、異常はなかった。3.遺伝性多飲マウスのバゾプレッシンV2受容体遺伝子の塩基配列を決定したが、異常はなかった。4.遺伝性多飲マウスのバゾプレッシンおよびオキシトシンmRNAとそれぞれの脳内の局在は一致したが、バゾプレッシン遺伝子は視床下部で過剰に発現していた。5.遺伝性多飲マウスおよびコントロールマウスでバゾプレッシンV1受容体およびオキシトシン受容体の脳内分布をオートラジオグラフィー法により検討したところ、視床傍室核のバゾプレッシンV1受容体が、コントロールマウスに比べて遺伝性多飲マウスで多かった。オキシトシン受容体の脳内分布には明らかな差異はなかった。6.遺伝性多飲マウスの学習能力はコントロールマウスよりも優れていることが示唆された。7.パッチクランプ法を用いて、ラットおよびマウス脳スライス標本の視索上核の神経分泌ニューロンから電気記録を行ない、シナプス電流を解析した。また、視索上核から単離した神経分泌ニューロンを用いて、パッチクランプ法により電気記録を行った。8.カルシウム画像解析法を用いて、グルタミン酸受容体アゴニストの刺激により、単離した神経分泌ニューロンで細胞内カルシウム濃度が濃度依存性に上昇することが観察された。9.脳スライス標本の視索上核の神経分泌ニューロンからパッチクランプ法を用いた電気記録を行なうと同時に細胞内カルシウム濃度の同時測定に成功した。