Die Bedeutung von Tiam-1 und Rac-1 für die Regulation des Invasionsverhaltens humaner Nierenkarzinomzellinien in vitro

第一，1994年，约翰·科拉德的工人们开始了对小GT 1赛车的比赛。研究Tiam 1在小鼠T淋巴细胞侵袭和转移中的作用，以探讨Tiam 1在MDCK-Zellen细胞侵袭中的表达。但在人类肿瘤中检测Tiam 1和Rac 1的功能并不明显，我们可以通过对人类恶性肿瘤的早期诊断，发现Tiam 1对人类恶性肿瘤也有显著的抑制作用。因此，我们知道，通过Rac 1激活E-Cadherin也可以通过“金属蛋白酶组织抑制剂-1和-2”的高调节作用，从而使分子侵入Tiam 1的N-末端PH区。这是我们在人类肿瘤中检测到的Tiam 1和Rac 1突变的第一步。这是一个与John Collards Gruppe合作的项目，该项目旨在验证生物学和生物化学检测中发现的Tiam 1和Rac 1突变的功能。Außerdem sollen die bislang detektierten potentiellen Bindungspartner für Tiam 1 identifiziert and hinsichtlich irer regulatorischen Bedeutung für die Funktion von Tiam 1 analysiert韦尔登。Schließlich soll mit Hilfe des Yeast Two-Hybrid Systems nach weiteren Bindungspartnern für Tiam 1 gesucht韦尔登.

Tiam1, welches 1994 von der Arbeitsgruppe um John Collard entdeckt wurde, aktiviert die kleine GTPase Rac1. Während Tiam1 in einer murinen T-Lymphomzellinie Invasion und Metastasierung induziert, führt die Überexpression von Tiam1 in Ras-transformierten MDCK-Zellen zur Invasionshemmung. Nachdem bislang keine funktionellen Untersuchungen zu Tiam1 und Rac1 in humanen Tumoren durchgeführt wurden, konnten wir am Beispiel humaner Nierencarcinomzellinien erstmals zeigen, daß Tiam1 auch die Intensivität humaner Carcinome signifikant inhibiert. Außerdem konnten wir nachweisen, daß diese Invasionshemmung auf molekularer Ebene entscheidend von der N-terminalen PH-Domäne von Tiam1 abhängt, zumindest teilweise durch Rac1 vermittelt wird und sowohl mit einer Aktivierung von E-Cadherin als auch mit einer Hochregulation der "tissue inhibitors of metalloproteinases-1 und -2" einhergeht. Darüber hinaus ist es uns erstmals gelungen, Punktmutationen von Tiam1 und Rac1 in humanen Tumoren zu detektieren. Ziel des beantragten Projekts ist es, in Kooperationen mit John Collards Gruppe die funktionelle Bedeutung der von uns gefundenen Punktmutationen für Tiam1 und Rac1 in verschiedenen zellbiologischen und biochemischen Assays zu untersuchen. Außerdem sollen die bislang detektierten potentiellen Bindungspartner für Tiam1 identifiziert und hinsichtlich ihrer regulatorischen Bedeutung für die Funktion von Tiam1 analysiert werden. Schließlich soll mit Hilfe des Yeast Two-Hybrid Systems nach weiteren Bindungspartnern für Tiam1 gesucht werden.