薬物分子の「柔構造」と動的構造の解析に基づく医薬品の分子設計

基于药物分子“灵活”和动态结构分析的药物分子设计

• 批准号: 07772219
• 负责人: 後藤 了
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07772219/
• 关键词: グルコース輸送担体; サイトカラシン; ブレフェルジン; CONFLEX3

文献で報告されたサイトカラシン類による赤血球グルコース輸送担体の阻害濃度と構造解析の結果では、サイトカラシンBおよびAのα,β-不飽和ラクトンとγ位水酸基ないしケト基によって決定づけられる14員環構造のコンフォメーションをMM計算およびH-NMR測定とで確認し、その立体構造と活性との比較から活性コンフォマ-を明らかにした。そこでさらにサイトカラシンとの構造類似性が高いと考えられるブレフェルジンAとその誘導体の立体構造の解析を行い、生理活性の予測を行った。この標的タンパク質となる赤血球バンド4.5(グルコース輸送担体)は膜貫通型で、膜表面側のグルコース認識部位がトリプシンによる切断を受けることが知られている。そこでTPCK処理トリプシンの活性に対するグルコースの阻害を測定した。赤血球膜を強アルカリ(NaOH)抽出またはカオトロピックイオン(KI)抽出法によって膜内在性タンパク質の分離を行ったところ分子量93kDa(バンド3、アニオン輸送担体),60kDa(バンド4.5)の2つのタンパク質を単離した。バンド3はモノクローナル抗体を用いた解析の結果、TPCK処理トリプシンによって52.42.19kDaの3種類の膜中フラグメントになることを明らかにし、これ以外の38.33.26kDaの3つのバンドがバンド4.5に由来するフラグメントである可能性を見いだした。そこで、この系を用いてグルコース輸送担体に結合する化合物を加えたところバンド4.5の断片フラグメントの生成が抑制されたが、バンド3由来のフラグメント生成と比較したところ定量的に一致する結果が得られないことがわかった。そこで現在、TPCK処理トリプシンの活性に対するグルコースおよびその構造類似化合物による抑制作用を検討中であり、この問題を解決した後サイトカラシンとブレフェルジンとの基本骨格の相違による生理活性の相違を測定する。

The results of structural analysis and inhibition concentration of erythrocyte transport carriers were reported in the literature. The α,β-unsaturated and γ-hydroxy groups of erythrocyte transport carriers were determined by MM calculation and H-NMR determination. The structural similarity of the three dimensional structure of the three dimensional structure of the The red blood cell of the target is 4.5(transport carrier), and the membrane is penetrated, and the membrane surface is recognized. The resistance of TPCK to the activity of the enzyme was measured. The separation of erythrocyte membrane by NaOH extraction method has a molecular weight of 93kDa(pH 3, pH 3),60kDa(pH 4.5) and 2 kDa. The results of analysis of the use of anti-TPCK antibodies show that the possibility of TPCK treatment of three kinds of membrane proteins with a molecular weight of 52.42.19 kDa is higher than that of 38.33.26 kDa. The results of the quantitative analysis of the compound binding to the transport carrier were consistent with those of the inhibition of fragment formation in the system. Currently, the inhibitory effect of TPCK on the activity of streptomycin and other structurally similar compounds is under discussion. After this problem is solved, the physiological activity of streptomycin and streptomycin will be determined due to the contradiction of their basic characteristics.

项目成果

Eiji Majima,Satoru Goro,Hiroshi Hori,Yasuo Shinohara,Yearg Man Houg: "Stabilities of the Fluorascent SH-Reazenc Eosin-5-makimide and Its Adducts with Sulfaydryl Compounds" Biochimica et Biophysica Acta. 1243. 336-342 (1995)

Eiji Majima、Satoru Goro、Hiroshi Hori、Yasuo Shinohara、Yearg Man Houg：“荧光 SH-Reazenc Eosin-5-makimide 及其与 Sulfaydryl 化合物的加合物的稳定性”Biochimica et Biophysicala Acta。