RecG蛋白質による相同組換え中間体ホリデ-構造の分岐点移動反応の分子機構

RecG蛋白同源重组中间体结构分支点转移反应的分子机制

• 批准号: 07780601
• 负责人: 岩崎 博史
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07780601/
• 关键词: DNAヘリケース; RNAヘリケース; 相同組換え; RecG蛋白質; ホリデ-構造; DNA複製; 大腸菌; 安定DNA複製

大腸菌のRecGタンパク質は,遺伝的相同組換えの反応中間体であるホリデ-構造のDNA分岐点移動反応を促進するDNAヘリケースである。ホリデ-構造のプロセッシングには,別にRuvタンパク質群(RuvA-RuvB複合体;ホリデ-構造のヘリケース,RuvC;ホリデ-構造特異的エンドヌクレアーゼ)が知られており,RecGとRuvタンパク質との機能的相違点は興味が持たれるが,本研究では,RecGタンパク質の新たな機能として以下のことを明らかにした。1)RecGタンパク質は,2次構造をとるRNAとDNAとのハイブリッド(R-ループ)のRNA部分を巻戻す活性(R-ループ特異的RNAヘリケース活性)がある。2)RecGの過剰発現によって,ColE1プラスミドのコピー数が減少する。3)in vitroのColE1のDNA複製開始が,RecGを添加することによって阻害される。ColE1の複製開始には,R-ループがプライマーとして関与することが知られており,RecGによるこのDNA合成阻害は,1)の活性によるものである。以上の結果は,RecGがColE1プラスミドのDNA複製開始にも関与していることを示す。一方,RnaseH欠損株でみられる大腸菌の染色体複製(安定DNA複製)にRecGが関与することを示唆する他のグループの遺伝学的解析があるが,本研究成果は,そのアナロジー,もしくは,モデル系と考えられ,今後,RecGの染色体複製における役割をin vitroで解析する端緒とすることができた。

E. coli recept, the same component of the genetic transformation of the reaction intermediate, the structure of the DNA divergence point shift reaction to promote the DNA reaction The Ruv-structure complex (RuvA-RuvB complex; RuvC; RuvC structure-specific RuvC complex) is known to be the antithesis point between RecG and RuvC properties and functions. In this study, RecG properties and new functions are clarified. 1) Recreation of DNA and RNA activity of RNA part (R-protein specific RNA activity). 2)RecG's over-occurrence reduces the number of ColE1 profiles. 3) DNA replication in vitro and ColE1 starts, and RecG is added to prevent DNA replication. ColE1 replication initiation, R-R-R- The above results indicate that RecG is involved in the initiation of DNA replication at ColE1 level. On the one hand, the chromosome replication of Escherichia coli (stable DNA replication) in RnaseH deficient strains is related to the genetic analysis of other strains. The results of this research are as follows: In the future, the chromosome replication of RecG is related to the genetic analysis of other strains.

项目成果

H.Shinagawa,et al.: "Molecular mechanisms of Holliday junction processing in Escherichia coli" Adv.Biophys.31. 49-65 (1995)

H.Shinakawa 等人：“大肠杆菌霍利迪连接体加工的分子机制”Adv.Biophys.31。

A.Saito,et al.: "Identification of four acidic amino acids that constitute the catalytic center of the RuvC Holliday junction resolvase" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 92. 7470-7474 (1995)

A.Saito 等人：“构成 RuvC Holliday junction 分解酶催化中心的四种酸性氨基酸的鉴定”Proc.Natl.Acad.Sci.USA。