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トランジェニックマウスを用いたカルモジュリン遺伝子の神経特異的な発現の解析

使用转基因小鼠分析钙调蛋白基因的神经特异性表达

基本信息

批准号：
07780726
负责人：
池島宏子
金额：
$ 0.7万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ラットCaMIIIの-877から+103までの領域は培養細胞において十分高いプロモーター活性を示した。CaMIIIの-410近傍にはCaMIIで種を超えて高く保存されている34bpの塩基配列(H3領域)が含まれている。我々はCaMIIIの-877から+102までの下流にレポーター遺伝子lacZをつなぎ、この領域の組織特異的なプロモーター活性をトランスジェニックマウスを用いて検討した。組織切片における導入遺伝子の発現をベータガラクトシダーゼの活性によって、また内在性のCaMIIIの発現部位をin situハイブリダイゼーション法を用いて発生段階を追って比較分析した。脊髄においては、胎児13.5日目では腹側領域の前角における発現は強く、その他、後根神経節や三叉神経節、交感神経節においても発現が認められた。成体の時期の脊髄では前角の運動ニューロンや後角の小さい細胞を含めたほとんどのニューロンで発現が認められた。小脳では、新生時期から生後9日目には導入遺伝子はPurkinjie細胞において強い発現が認められ、内顆粒層では弱い発現であった。成体マウスになるとPurkinje細胞と共に顆粒細胞層においても発現が増強された。大脳では生後2日目には海馬と大脳皮質の錘体細胞において発現が検出された。さらに9日目には海馬のCA1からCA3の錘体細胞と歯状回の顆粒細胞に1acZの発現が限局しており、その分布が成体に至るまで継続して検出された。以上の神経系における導入遺伝子の発現は、内在性のマウスCaMIIIの発現と良い一致が見られた。これらの結果よりラットCaMIIIの-877から+103までのプロモーター領域が神経系特異的な発現を制御していることが明らかとなった。我々はこれまでにCaMIIの中枢神経系にける発現を再現するためには、CaMIIの-294から+68までの領域のみならずさらに上流にあるH3領域が必要であることを予想していた。本研究結果は、CaM遺伝子群の神経系における発現の「H3領域」の必要性を示した。

CaMIII-877 and +103 are highly active in cultured cells. CaMIII and-410 near the CaMII species, the 34bp nucleotide sequence (H3 domain) is preserved. I'm sorry, but I'm sorry. I'm sorry. Tissue sections were used to compare the development stages of CaMIII with the development stages of CaMIII. The anterior horn of the ventral region appears strong, the posterior nerve segment, the trigeminal nerve segment, and the sympathetic nerve segment appear strong, and the posterior nerve segment appears strong, and the sympathetic nerve segment appears weak. In the adult stage, the ridge and the front corner move, and the small cell in the back corner moves. In the newborn period, the Purkinjie cells are introduced into the Purkinjie cells, and the inner granular layer is weak. The adult Purkinje cells grow stronger 2 days after birth, the hippocampus and hippocampus cortex cells appeared in the brain. The development of CA1 and CA3 in hippocampus and granulosa cells in dentate gyrus was limited, and the distribution of CA1 and CA3 in hippocampus was limited. The occurrence of the above-mentioned gene in the nervous system is opposite, and the occurrence of the intrinsic gene in the MIII is opposite. The result is that CaMIII's-877 The central nervous system of CaMII appears in the field of CaMII-294,+68 and H3. The results of this study demonstrate the necessity of H3 domain for the development of CaM gene subgroup in the nervous system.