炎症性サイトカインとそのレセプター遺伝子発現機序の解析とその制御

炎症细胞因子及其受体基因表达机制及调控分析

• 批准号: 07672375
• 负责人: 笠原 忠
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Kyoritsu University of Pharmacy
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 1997
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07672375/
• 关键词: 炎症性サイトカイン; インターロイキン-8; ケモカイン; 血管内皮細胞; ミエローマ; 核内転写因子; 単球走化因子; IL-8; MCAF(MCP-1); 好酸球

私共はIL-1やTNFによって誘導されるIL-8、MCAFなどの炎症性サイトカインがin vitroおよびin vivoでの役割を明らかにするため、本研究を行い、以下のような成果を得た。(1)種々の培養細胞におけるIL-8/MCP-1/JEおよびその遺伝子発現の解析を行った。とくに、ヒト好酸球で、IL-8産生を見たところ、Ca5の処理によって著名なIL-8産生が見られた(Miyamasuら 、'95)。また、ヒトHL-60をレチノール酸およびDMSOによって好中球に分化させるとIL-8産生能が増大し、IL-8R発現の増加が見られた。さらに、IL-8遺伝子発現へのシグナル伝達を調べる目的で、NF-kBとのゲルシフト法を検討した(園田、論文投稿中)。(2)動脈硬化発症解析の一環として、ヒト血管内皮細胞と好中球・単球との接着におけるケモカインの関与を検討した。すなわち、血管内皮細胞は単球との接着によりIL-8およびMCP-1/JEを産生することをELISA、ノーザンブロットおよび免疫組織化学染色により明らかにした(Takahashiら、'95,'96,'97;Seinoら'95)。さらに脳腫瘍における炎症性サイトカイン発現について培養グリオーマ細胞株において検討を行った(Kasaharaら、投稿中)。(3)ヒトMCP-1/JE cDNAをBCMGSneoをミエローマ細胞株で発現させた。この細胞株をヌードマウスに移植し、in vivoにおける抗腫瘍増殖効果を検討したところ、腫瘍の周辺に単球・マクロファージが浸潤すると共に、単球の増加が観察された(Hoshinoら,'95)。また、IL-8RタイプA,Bを発現させ、これに対する特異抗体を作製した後、骨髄分化段階におけるIL-8レセプターの発現の解析を行った(Wangら,'96)。本研究について今後の継続課題としたい。

IL-1, TNF, IL-8, MCAF, IL-8, IL-8, MCAF, IL-8, IL-8, IL-8, (1)Analysis of IL-8/MCP-1/JE gene expression in cultured cells The production of IL-8 is also known as the production of IL-8 in the treatment of Ca5 (Miyamasu,'95). IL-8 production and IL-8R production increased due to the presence of IL-60 and DMSO. In addition, IL-8 gene development and gene expression are discussed in this paper. (2)A study of the relationship between vascular endothelial cells and atherosclerosis The expression of IL-8 and MCP-1/JE was detected by ELISA and immunohistochemical staining (Takahashi,'95,'96,'97;Seino,'95). In addition, the inflammatory cells developed in the culture medium (Kasahara, submission) (3)MCP-1/JE cDNA was developed in BCMGSneo cells The cell lines were transplanted, in vivo, and the anti-tumor growth effect was investigated. IL-8 receptor A,B was detected and specific antibodies to IL-8 receptor A, B were detected and analyzed in bone marrow differentiation stages (Wang,'96). This study is intended for future research topics.

项目成果

Miyamasu, M.: "Chemotactic agonists induce cytokine generation in eosinophils" J. Immunol.154. 1339-1349 (1995)

Miyamasu, M.：“趋化激动剂诱导嗜酸性粒细胞中细胞因子的产生”J.Immunol.154。

Yasumoto,K.,Mukaida,N.,Kasahara,T.,et al.: "Molecular analysis of the cytokine network involved in cachexia in colon 26 adenocaricinoma-bearing mice." Cancer Res.55. 921-927 (1995)

Yasumoto,K.、Mukaida,N.、Kasahara,T.等人：“结肠 26 腺癌小鼠恶病质相关细胞因子网络的分子分析。”

Seino, Y.: "Expression of monocyte dhmoatractant protein-1 in vascular tissue" Cytokine. 7. 576-579 (1995)

Seino, Y.：“血管组织中单核细胞 dhmoatractant 蛋白 1 的表达”细胞因子。

Takahashi,M.,Masuyama,J-I.,Kasahara,T.,et al.: "Induction of monocyte chemoattractant protein-1 synthesis in human monocytes during transendothelial migration in vitro." Circulation Res.76. 750-757 (1995)

Takahashi,M.、Masuyama,J-I.、Kasahara,T.等人：“体外跨内皮迁移过程中人单核细胞趋化蛋白-1 合成的诱导”。

Takahashi,M.,Ikeda,U.,Kasahara,T.,et al.: "Monocyte-endothelial cell interaction induces expression of adhesion molecules on human umbilical cord endothelial cells." Cardiovas.Res.32. 422-429 (1996)

Takahashi,M.、Ikeda,U.、Kasahara,T.等人：“单核细胞-内皮细胞相互作用诱导人脐带内皮细胞上粘附分子的表达。”