CTP結合蛋白を介する細胞応答に及ぼす塩素イオン影響

氯离子对 CTP 结合蛋白介导的细胞反应的影响

• 批准号: 07770074
• 负责人: 三上 斗支子
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Kansai Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770074/
• 关键词: 塩素イオン; 代謝型グルタミン酸受容体; IP_3産生; CHO細胞

神経細胞の抑制性制御に果たす塩素イオンの役割は大きく、膜電位を変化させることにより神経細胞の活動性を修飾することはよく知られている。このような膜電位変化を伴う作用の他に、塩素イオンがGTP結合蛋白に直接働き、その活性を制御することが明らかになってきた。本研究は、このGTP結合蛋白への塩素イオンの直接作用がin vivoの情報伝達系においてその伝達効率や強度に与える影響を明らかにすること、さらには塩素イオンによる活性制御を受けるGTP結合蛋白内部位と、その修飾様式を明らかにすることを目的とした。1、反応系の設定- 本研究では、GTP結合蛋白を介した情報伝達の指標として代謝型グルタミン酸受容体(mGluR1α)刺激によるIP_3産生量を観察した。また細胞は、純粋で安定な反応系を確保するため、mGluR1αのcDNAをトランスフェクトした Chinese Hamster Ovary (CHO) cell を用いた。2、細胞内塩素イオン濃度の調節- 細胞内塩素イオン濃度を容易に調節すると共に、塩素イオンによる細胞膜電位変化による細胞応答への影響を消去する条件として、細胞を30μg/mlのサポニンで5分間処置することが最適であった。3、IP_3産生量の測定- 細胞内塩素イオン濃度変化により、IP_3産生量は2相性に変動した。またこのよう変動は、細胞外塩素イオン濃度の変化のみでは見られなかった。今回の実験では、細胞内での塩素イオンの直接作用を検討する実験系を確立し、この系を用いて塩素イオンが細胞内への直接作用によりmGluR1αを介する細胞内情報伝達効率を修飾することを明らかにした。今後はその修飾部位及び修飾様式いついてさらに検討することが必要であると考えられる。

The inhibitory effect of the neuron on the activity of the neuron is to change the membrane potential and modify the activity of the neuron. The membrane potential of the protein is regulated by other factors, such as protein binding, protein binding and protein binding. In this study, the direct effect of GTP binding protein on protein expression in vivo was studied. The expression rate and intensity of GTP binding protein expression in vivo were investigated. 1. The setting of the reaction system-In this study, we investigated the expression of IP3 in response to the stimulation of mGluR1 α. The cDNA for mGluR1 α is used in Chinese Hamster Ovary (CHO) cells. 2. Regulation of intracellular hormone concentration-easy regulation of intracellular hormone concentration, elimination of the effect of intracellular hormone concentration on cell membrane potential, and optimal treatment of intracellular hormone concentration at 30μg/ml. 3. Determination of IP_3 production-the change of intracellular concentration of IP_3 and the change of IP_3 production were biphasic. The concentration of extracellular hormones in the brain changes rapidly. The present study is aimed at establishing a system for investigating the direct action of intracellular signaling mediated by mGluR1 α. In the future, it is necessary to examine the modified parts and the modified forms.

项目成果

Toshiko Uriu-Mikami: "Two types of clathrin-coated vesicles isolated from rat brain; Analysis of biochemical properties and cellular origin" J. Neurochem.56. 1548-1556 (1991)

Toshiko Uriu-Mikami：“从大鼠脑中分离出两种类型的网格蛋白包被的囊泡；生化特性和细胞起源的分析”J. Neurochem.56。