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rho依存性の細胞接着および細胞骨格形成制御の分子機序の解明

阐明rho依赖性细胞粘附和细胞骨架形成控制的分子机制

基本信息

批准号：
07770080
负责人：
斎藤雄二
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

低分子量GTP結合蛋白質rho p21は細胞骨格形成、細胞基質間接着、細胞質分裂時の収縮環形成、細胞運動などを制御する。しかしながら、これまでrho p21の細胞内での作用の分子機序は全く不明であった。rho p21を介する情報伝達系を解明するためにrho p21の標的分子を世界にさきがけて同定した。two hybrid法を用いて同定されたrhophilinは一次構造上、触媒活性をもたないと推定されたが、そのrho p21との結合領域はプロテインキナーゼ N(PKN)と相同性を示した。ligand overlay法を用い同定されたRho-associated, coiled-coil containing protein kinase(p 160 ^<ROCK>)はセリンスレオニンキナーゼであり、その触媒領域は筋緊張性ジストロフイ-の原因遺伝子産物であるmyotonic dystrophy kinaseと相同性を示した。PKNとp 160^<ROCK>は、GTP結合型rho p21と特異的に結合し、また、in vivoならびにin vitroにてGTP結合型rho p21存在下、約2倍のキナーゼ活性の上昇を示した。以上の結果は、これらの分子がrho p21の作用を発揮するエフェクター分子であることを強く示唆する。現在、これらの細胞内における役割について解析中である。rho p21の標的分子の機能を明らかにすることによりストレス繊維形成、インテグリン活性化、細胞質分裂などの機序が解明されることが期待される。

Rho p21, a low molecular weight GTP binding protein, is involved in cell skeleton formation, cell-matrix adhesion, contraction loop formation during cytoplasmic division, and cell motility control. The molecular mechanism of rho p21's intracellular action is unknown. rho p21 is the target molecule of the information system. The two hybrid method is used to determine the identity of rhophilin in the primary structure, catalyst activity, and rho p21. Ligand overlay method is used to determine Rho-associated, coiled-coil containing protein kinase(p 160 ^<ROCK>). PKN p160 ^<ROCK>+, GTP binding rho p21 ^+, GTP binding rho p21 ^+ The above results show that rho p21 plays an important role in the development of molecular biology. Now, this is the cell inside the cell. The function of rho p21 target molecule is expected to be clarified in the following aspects: protein formation, protein activation, and the mechanism of cytoplasmic division.