カドミウム投与ラットの組織中c-fos及びc-myc遺伝子mRNAレベル

镉处理大鼠组织中c-fos和c-myc基因mRNA水平

• 批准号: 07770263
• 负责人: 松岡 雅人
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: University of Occupational and Environmental Health, Japan
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770263/
• 关键词: カドミウム; mRNA; RT-PCR; c-fos; c-myc

これまでにin vitro実験において、カドミウムが近位尿細管由来上皮細胞のc-fos、c-mycおよびEgr-1遺伝子のmRNAレベルを著明に増加させることをノーザンブロット法を用いて明らかにした。本研究では、カドミウムによるc-fosおよびc-myc遺伝子増幅が、カドミウム投与動物の組織中で認められるかどうかについて、検討した。正常な組織におけるc-fosおよびc-myc遺伝子の発現量は、一般的に極めて少なく、軽度の発現量の変化を検出することは必ずしも容易ではない。そこで、まず、reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR)法によるc-fosおよびc-myc遺伝子のmRNAレベルの定量に関する基礎的検討を行った。その結果、c-fosおよびc-myc遺伝子のmRNAレベルを、簡便に短時間で、従来のノーザンブロット法と同様に定量することが可能になった。塩化カドミウムをマウスに皮下投与し(4mgカドミウム/kg体重)、組織中(脳、肝、腎)のc-fosおよびc-myc遺伝子のmRNAレベルをRT-PCR法により測定した。その結果、今回の投与実験では、in vitro実験で認められるような明らかな遺伝子発現の増幅はなかった。しかし、今後、カドミウム投与量および最終投与後からRNA分離までの時間を変えた実験が、必要と思われる。現在、カドミウムの総投与量を段階的に増加させたマウスの組織中mRNAレベル、さらにウエスタンブロット法を用いた各蛋白量の変化について、引き続き、検討を行っている。

こ れ ま で に in vitro be 験 に お い て, カ ド ミ ウ ム が epithelial cells of the proximal tubule urine origin の c fos, c myc お よ び Egr 1 heritage 伝 son の mRNA レ ベ ル を with Ming に raised さ せ る こ と を ノ ー ザ ン ブ ロ ッ を ト method with い て Ming ら か に し た. This study で は, カ ド ミ ウ ム に よ る - c fos お よ び c - myc heritage 伝 child rights が, カ ド ミ ウ ム の organization with animals of で recognize め ら れ る か ど う か に つ い て, beg し 検 た. Normal な tissue に お け る c - fos お よ び c - myc heritage 伝 son の は 発 now quantity, general に め て less な く, 軽 の 発 amount is の variations change を 検 out す る こ と は will ず し も easy で は な い. そ こ で, ま ず, reverse transcription - polymerase chain reaction (rt-pcr) method に よ る - c fos お よ び c - myc posthumous son 伝 の mRNA レ ベ ル の quantitative に masato す る basic line beg を 検 っ た. そ の results, c - fos お よ び c - myc posthumous son 伝 の mRNA レ ベ ル を, handy に で short time, 従 to の ノ ー ザ ン ブ ロ ッ と ト method with others in quantitative す に る こ と が may に な っ た. Salt chemical カ ド ミ ウ ム を マ ウ ス に cast with subcutaneous し (4 mg カ ド ミ ウ ム / kg body weight), organization (脳, liver and kidney) の c - fos お よ び c - myc heritage 伝 son の mRNA レ ベ ル を rt-pcr method に よ り determination し た. そ の results, this の cast back and be 験 で は, the in vitro be 験 で recognize め ら れ る よ う な Ming ら か な heritage 伝 son 発 の raised は picture now な か っ た. し か し, in the future, カ ド ミ ウ ム cast and quantity お よ び finally cast and after か ら RNA separation ま で の time を - え た be 験 が, necessary と わ れ る. Now, カ ド ミ ウ ム の 総 cast and quantity を Duan Jie に raised and さ せ た マ ウ ス の tissue mRNA レ ベ ル, さ ら に ウ エ ス タ ン ブ ロ ッ を ト method with い た each protein quantity の variations change に つ い て and き 続 き, beg を 検 っ て い る.