神経線維腫症1型(NF1)におけるNF1遺伝子変異の解析

1型神经纤维瘤病（NF1）的NF1基因突变分析

• 批准号: 07770331
• 负责人: 八田 信朗
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770331/
• 关键词: neurofibromatosis 1; PCR-SSCP; mutation

私どもはneurofibromatosis 1(NF1)患者におけるNF1変異について検討してきた。1995年度の研究目標として、51個のexonすべてについてprimerを作成し、polymerase chain reaction(PCR)-single strand conformation polymorphism (SSCP)法を用いて検討を行ってきた。その結果、exon 31に1個のadenineの挿入を認める症例を見いだした。この症例では、1個のadenineの挿入によりexon 31の下流にstop codonを生じ、不完全な長さのNF1遺伝子産物が存在することが推定された。この変異は、今までに報告のない新しい変異であった。更に私どもは、intron 31においてadenine→guanineの1塩基置換のある2症例を見いだした。この変異は新たなsplicing acceptor siteを生ずることが推定され、私どもはこの2例のNF1患者の末梢血にEB virusを感染させリンパ芽球株を樹立した。リンパ芽球株からRNAを抽出し、reverse transcriptase (RT)-PCRを行い、その産物をplasmidにsubcloningすることにより塩基配列を決定した。その結果この2例ではintron 31の1塩基置換により新たなsplicing acceptor siteを生じ、4塩基挿入されたmRNAが存在することが明らかとなった。更に変異を持つmRNAの定量を行ったところmutant alleleはwild alleleの約3分の1であり、少量に変異体によってもNF1が発症することが判明した。興味あることにこの変異は欧米において2つの施設より1例ずつ報告されており、intron 31のsplicing変異は人種を越えたhot spotであることが明らかとなった。

Neurofibromatosis 1(NF1) is the most common type of neurofibromatosis. In 1995, 51 exons were used to construct primers, and polymerase chain reaction(PCR)-single strand conformation polymorphism (SSCP) method was used to investigate primers. The results, exon 31 and 1 of the adenine were identified. In this case, one adenine was inserted into the downstream of exon 31, and an incomplete NF1 gene product was presumed to exist. This report is new and different. In addition, intron 31 has two cases of adenine→guanine substitution. The two patients were infected with EB virus in peripheral blood. RNA extraction, reverse transcriptase (RT)-PCR, plasmid cloning and gene sequencing The results showed that intron 31 had a new splicing acceptor site and a new splicing acceptor site. In addition, the quantitative analysis of mutant allele mRNA showed that the mutant allele was about 3 points higher than the wild allele, and the mutant allele was about 3 points higher than the wild allele. 1 case report, intron 31, splicing, different races, hot spot, bright spot, etc.