サイトカインによる膵島細胞のDNA鎖切断とポリADPリボース合成の検討

细胞因子诱导的胰岛细胞 DNA 链断裂和聚 ADP 核糖合成的检查

• 批准号: 07770849
• 负责人: 稲田 千鶴子
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Kurume University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770849/
• 关键词: サイトカイン; DNA鎖切断; Fas; nitric oxide; poly(ADP-ribose)合成酵素

サイトカインによるDNA鎖切断にFas抗原が関与しているかどうかをみるために,マウス膵島細胞をIL-1αの存在下で4〜12時間培養するとFas mRNAが誘導された。IL-1αとの12時間の培養後,Fas抗体を加えたところ,膵島細胞障害が惹起され,48時間後の特異的^<51>Cr放出率は61±4%に達した。蛋白合成阻害財であるシクロヘキサミドをFasと共に加えると,細胞死はさらに増強された。IL-1αとFas抗体により破壊された膵島細胞では,DNA切断が証明された。Fas抗体による膵島細胞障害は,L-アルギニン不含培地でも認められ,NO合成阻害剤のNMMAによっても部分的にしか阻止されなかった。また,サイトカインによるpoly(ADP-ribose)合成の関与を検討するために,マウス膵島細胞cell lineを用い,フィルター法により^3H-NADの不溶分画への取り込みとしてpoly(ADP-ribose)合成酵素活性を測定した。poly(ADP-ribose)合成酵素活性は,human TNF-αとmouse IFN-γを18時間併用することにより,100 U/mlで124%に,200 U/mlで133%に上昇した。5mM 3-アミノベンザミドによりそれぞれ104%,107%に抑制されることが証明された。以上の結果より,サイトカインが膵島細胞のDNA鎖切断を惹起することによりpoly(ADP-ribose)合成酵素を活性化することが明らかになった。また,サイトカインはFasを介する膵島細胞のapoptosisにも関与している可能性が示された。

Fas mRNA was induced in 4 ~ 12 hours of culture in the presence of IL-1α. After IL-1α was cultured for 12 hours,Fas antibody was increased, and the specific <51>Cr release rate reached 61±4% after 48 hours. The protein synthesis is inhibited by the increase in protein production. IL-1α and Fas antibodies were detected by DNA cleavage in isolated cells. Fas antibody is used to inhibit the growth of human cells, but it does not contain any culture medium. To determine the activity of poly (ADP-ribose) synthase in the insoluble fraction of H-NAD Poly(ADP-ribose) synthase activity increased by 124% for human TNF-α and 133% for mouse IFN-γ when used in combination for 18 hours at 100 U/ml and 200 U/ml, respectively. 5 mM 3-aminoethyl acetate was found to be 104%, 107% inhibited. As a result, the DNA lock of the island cells was activated by poly(ADP-ribose) synthase The possibility of apoptosis in human islet cells is demonstrated by the presence of Fas.