Development of live vaccine used transgenic Leishmania parasite

使用转基因利什曼原虫寄生虫开发活疫苗

基本信息

  • 批准号:
    08456149
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 4.74万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
  • 财政年份:
    1996
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1996 至 1997
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

Leishmaniasis is often a zoonosis in which dog is known to be one of the most important animal reservoirs. For control of such zoonotic deseases, development of a vaccine directed against the natural reservoir host is desirable. In this study, we successfully produced, by molecular engineering, Leishmania amazonensis promastigotes expressing biologically active canine interleukin-8 (cIL-8). The PCR products of cIL-8 cDNA were inserted into the L.amazonensis expression vector (p6.5) which was designed to contain a tunicanycin (TM) resistance gene for selection. The constructed expression vector (p6.5-cIL-8) was transfected into promastigotes of a L.amazonensis clone (C_1/12) by electroporation. Transfectants were selected in culture madium with TM.By PCR of extrachromosomal DNAs from the transfectants using cIL-8 specific primers, a predicted product of a 330 bp long was amplified. Western blot analysis of the trnsfectants demonstrated a peptide of about 8.8kDa in molecular size, as expected of cIL-8. The culture supernatant of the transfectant showed a chemotactic activity with dog and mouse polymorphonuclear cells (PMN).
利什曼病通常是一种人畜共患病,其中狗是已知的最重要的动物宿主之一。为了控制这种人畜共患疾病,需要开发针对天然储库宿主的疫苗。在这项研究中,我们成功地产生,通过分子工程,利什曼原虫亚马逊前鞭毛体表达生物活性犬白细胞介素-8(cIL-8)。将cIL-8 cDNA的PCR产物插入到亚马逊乳杆菌表达载体(p6.5)中,该载体设计成含有用于选择的衣霉素(TM)抗性基因。将构建的表达载体p6.5-cIL-8电转化亚马逊乳杆菌克隆(C_1/12)的前鞭毛体。用TM培养基筛选转染细胞,用cIL-8特异性引物对转染细胞染色体外DNA进行PCR扩增,得到一个330 bp的预期产物。Western印迹分析表明,转染子的分子大小约为8.8kDa的肽,如预期的cIL-8。转染子培养上清对狗和小鼠多形核白细胞(PMN)具有趋化活性。

项目成果

期刊论文数量(4)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
松本芳嗣ほか.: "Serological survey of the domestic dogs in Leishmaniasis-endemic dreas of Ecuador." Bulle Socie.Franco-Japonais Sci.Vet.7(1)(印刷中). (1997)
Yoshitsugu Matsumoto 等人:“厄瓜多尔利什曼病流行病中家犬的血清学调查。Bulle Socie.Franco-Japonais Sci.Vet.7(1)(出版中)”。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Mori M, Darco, C.A.et al.: "Seroepidemological aspects,Serological survey of the domestic doga in Ecuadcr." Bull.Soc.Franco-Japonais Sci.Vet.7(2). 30-41 (1997)
Mori M、Darco、C.A.等人:“血清流行病学方面,厄瓜多尔国内多加的血清学调查”。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Mori, M.Darco.C.A.at el.: "Seroepidemological aspects,Serologicalsurvey of the domestic doga in Ecuador" Bull.Soc.Franco-Japonais Sci.Vet.7(2). 30-41 (1997)
Mori, M.Darco.C.A.at el.:“厄瓜多尔国内犬的血清流行病学方面的血清学调查”Bull.Soc.Franco-Japonais Sci.Vet.7(2)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Mori, M., Matsumoto, Y., et al.: "Seloepidemological, Serological survey of the domestic dog in Ecuador" Bull.Soc.Franco-Japonais Sci.Vet.7 (2). 30-41 (1997)
Mori, M.、Matsumoto, Y. 等人:“厄瓜多尔家犬的流行病学、血清学调查”Bull.Soc.Franco-Japonais Sci.Vet.7 (2)。
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  • 发表时间:
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  • 通讯作者:
    平尾聡秀・原口竜成・山田利博

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