Identifizierung und funktionelle Charakterisierung von Enzymen, die extrazelluläre Diadenosinpolyphosphate spalten

Ziel des Projekts ist die molekulare und funktionelle Identifizierung der Enzyme，die extrazelluläre Diadenosinpolypropylene spalten. Diese Gruppe von Dinukleotiden wird von einer Reihe von Zelltypen organellär gespeichert und freigesetzt und kann rezeptorgetragene zelluläre Wirkungen auslösen.在制备二腺苷多磷酸的超细胞水解物时，未发现有明显的酶分子。Die Mitglieder der kürzlich beschriebenen Familie der Ekto-Nukleotidpyrophosphatasen/Phosphodiesterasen，kommen aufgrund ihrer Phosphodiesteraseaktivität als Kandidaten in Frage.在实验中，我们发现NPP 3是一个三个克隆的酶家族，在拉格中，二腺苷三磷酸、四腺苷三磷酸和五腺苷三磷酸水解。我们将韦尔登酶解产物进行三次酶解，并对酶解产物进行动力学参数分析。Die Arbeiten bilden die Grundlage für das Verständnis der Zelltyp- und gewebespezifischen Variabilität der extrazellulären Hydrolyse von Diadenosinpolyphosphaten und der Kontrolle der extrazellulären Wirkungen von Diadenosinpolyphosphaten.

Ziel des Projekts ist die molekulare und funktionelle Identifizierung der Enzyme, die extrazelluläre Diadenosinpolyphosphate spalten. Diese Gruppe von Dinukleotiden wird von einer Reihe von Zelltypen organellär gespeichert und freigesetzt und kann rezeptorgetragene zelluläre Wirkungen auslösen. Zwar wurde die extrazelluläre Hydrolyse von Diadenosinpolyphosphaten beschrieben, jedoch sind die zugrundeliegenden Enzyme molekular nicht identifiziert. Die Mitglieder der kürzlich beschriebenen Familie der Ekto-Nukleotidpyrophosphatasen/Phosphodiesterasen, kommen aufgrund ihrer Phosphodiesteraseaktivität als Kandidaten in Frage. In Vorversuchen haben wir gezeigt, daß NPP3, einer der drei klonierten Vertreter der Enzymfamilie, in der Lage ist, die Diadenosinpolyphosphate Diadenosintri-, -tetra-, und -pentaphosphat zu hydrolisieren. Wir werden die Fähigkeit aller drei Vertreter der Enzymfamilie, Diadenosinpolyphosphate zu spalten, analysieren und die kinetischen Parameter vergleichend untersuchen. Die Arbeiten bilden die Grundlage für das Verständnis der Zelltyp- und gewebespezifischen Variabilität der extrazellulären Hydrolyse von Diadenosinpolyphosphaten und der Kontrolle der extrazellulären Wirkungen von Diadenosinpolyphosphaten.