Ca^<2+>・リン脂質結合領域(C_2)を有する新しい蛋白質の機能と作用機構
具有Ca^2+/磷脂结合域的新蛋白的功能和作用机制(C_2)
基本信息
- 批准号:08670147
- 负责人:
- 金额:$ 1.6万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
- 财政年份:1996
- 资助国家:日本
- 起止时间:1996 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
私共の研究室では、2個のC2様領域を有する新しい蛋白質を2つ見い出し、それぞれRabphilin-3AとDoc2と命名している。これらの蛋白質は、シナプス小胞に局在し、そのC2様領域でCa^<2+>とリン脂質に結合することから、神経伝達物質の放出においてCa^<2+>センサーとして機能している可能性が高い。本年度の本研究では、Rabphilin-3AとDoc2が細胞内で神経伝達物質の放出に実際に働いていることを証明した。すなわち、私共は、Rabphilin-3AとDoc2と両者のアンチセンスや変異体の遺伝子を、ヒト成長ホルモン(GH)の遺伝子と共に、PC12細胞に強制発現させることによって、Rabphilin-3AとDoc2がCa^<2+>依存性のGHの分泌を制御することを明らかにした。さらに、Rabphilin-3Aとその変異体のリコンビナント蛋白質をヤリイカの巨大シナプスにマイクロインジェクションすることによって、Rabphilin-3Aが神経伝達物質の放出を制御することを明らかにした。一方、私共は、Rabphilin-3AがC2様領域以外のN末端側でα-アクチニンと結合し、α-アクチニンによるF-アクチニンのbundlingを促進することを明らかにした。したがって、Rabphilin-3Aは細胞骨格系をも介して神経伝達物質の放出を制御している可能性が出てきた。また、私共は、Doc2がC2様領域以外のN末端側でホルボールエステル結合領域であるCl領域を有する新しい蛋白質と結合することを見い出すと共に、この結合がホルボールエステル依存性であることを明らかにした。ホルボールエステルは神経伝達物質の放出を促進するが、Doc2とこの蛋白質との結合がその機構に作用している可能性が出てきた。このように、本年度の本研究は予想以上に進展し、当初の目的はほぼ完全に達成することができた。
Private の total laboratory で は, 2 の C2 を others in field have す る new し 2 see つ い い protein を し, そ れ ぞ れ Rabphilin - 3 - a と Doc2 と named し て い る. こ れ ら の protein は, シ ナ プ ス vesicular に bureau in し, そ の C2 others fields で Ca ^ 2 + < > と リ ン lipid に combining す る こ と か ら, god 経 伝 of substances released の に お い て Ca ^ 2 + < > セ ン サ ー と し て function し て い が high い る possibilities. This year の this study で は, Rabphilin - 3 - a と Doc2 が intracellular で god 経 伝 of substances released の に be interstate に 働 い て い る こ と を prove し た. Total は す な わ ち and private Rabphilin - 3 - a と Doc2 と struck is の ア ン チ セ ン ス や - variant の heritage 伝 を, ヒ ト growth ホ ル モ ン (GH) の heritage 伝 son と に, PC12 cells に forced 発 now さ せ る こ と に よ っ て, Rabphilin - 3 - a と Doc2 が Ca ^ < 2 + > dependency の GH の points Youdaoplaceholder0 control する とを とを Ming ら に に た た. さ ら に, Rabphilin - 3 - a と そ の - variant の リ コ ン ビ ナ ン ト protein を ヤ リ イ カ の huge シ ナ プ ス に マ イ ク ロ イ ン ジ ェ ク シ ョ ン す る こ と に よ っ て Rabphilin - 3 a が god 経 伝 of substances released の を suppression す る こ と を Ming ら か に し た. One party, private は, Rabphilin - 3 - a が C2 others in areas outside の N terminal side で alpha ア ク チ ニ ン と し, alpha ア ク チ ニ ン に よ る F - ア ク チ ニ ン の bundling を promote す る こ と を Ming ら か に し た. し た が っ て, Rabphilin - 3 a は cell skeleton を も interface し て god 経 伝 of substances released の を suppression し て い る possibility が out て き た. Total は ま た and private Doc2 が C2 others in areas outside の N terminal side で ホ ル ボ ー ル エ ス テ ル combining domain で あ る を Cl field have す る new し い protein と combining す る こ と を see い out す と に, こ の combining が ホ ル ボ ー ル エ ス テ ル dependency で あ る こ と を Ming ら か に し た. ホ ル ボ ー ル エ ス テ ル は god 経 伝 of substances released の を promote す る が, Doc2 と こ の protein と の combining が そ の institutions に role し て い る possibility が out て き た. <s:1> ように ように, this year <s:1> this research ように aims to make progress on the above に, and fully achieve the original goal of <s:1> ほぼ ほぼ に に た た た た た た た た た た た た た た た た た.
项目成果
期刊论文数量(14)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Fukui,K.: "Isolation and characterization ofa GTPase activating protein specific for the Rab3 subfamily of small G proteis." J.Biol.Chem.272. 4655-4658 (1997)
Fukui,K.:“小 G 蛋白 Rab3 亚家族特异的 GTP 酶激活蛋白的分离和表征。”
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- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Fujita,Y.: "Phosphorylation of Munc-18/n-Secl/rbSecl by protein kinase C-Its implication in regulating the interaction of Munc-18/n-Secl/rbSecl with Syntaxin." J.Biol.Chem.271. 7265-7268 (1996)
Fujita,Y.:“蛋白激酶 C 磷酸化 Munc-18/n-Secl/rbSecl——其在调节 Munc-18/n-Secl/rbSecl 与突触蛋白相互作用中的意义。”
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Hirao, M.: "Regulation mechanism of ERM (Ezrin/Radixin/Moesin) protein/plasma membrane association-Possible involvement of phosphatidylinositol turnover and Rho-dependent signaling pathway." J. Cell. Biol.135. 37-51 (1996)
Hirao, M.:“ERM (Ezrin/Radixin/Moesin) 蛋白/质膜关联的调节机制 - 可能涉及磷脂酰肌醇周转和 Rho 依赖性信号通路。”
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Masumoto, N.: "Involvement of Rabphilin-3A in cortical granule exocytosis in mouse eggs." J. Cell. Biol.135. 1741-1747 (1996)
Masumoto, N.:“Rabphilin-3A 参与小鼠卵子皮质颗粒胞吐作用。”
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- 发表时间:
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- 影响因子:0
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Orita, S.: "Doc2 enhances Ca^<2+> -dependent exocytosis from PC12 cells." J. Biol. Chem.271. 7257-7260 (1996)
Orita, S.:“Doc2 增强 PC12 细胞的 Ca^2 依赖性胞吐作用。”
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- 发表时间:
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- 影响因子:0
- 作者:
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