神経伝達物質の放出機構におけるRab3A低分子量G蛋白質系の機能と作用機構

Rab3A低分子量G蛋白系统在神经递质释放机制中的功能及机制

• 批准号: 07279225
• 负责人: 佐々木 卓也
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07279225/
• 关键词: Rab3A; 低分子量G蛋白質; 神経伝達物質; Rabphilin-3A; C2様領域; Ca^<2+>; Ca^<2+>センサー; RabGDI

私共の研究室では、Rab3A低分子量G蛋白質とその関連蛋白質による神経伝達物質の放出の制御について解析を続けている。私共は、Rab3Aの標的蛋白質Rabphilin-3Aを見い出しているが、本年度の本研究で、Rabphilin-3Aが細胞内で神経伝達物質の放出に実際に働いていることを証明した。すなわち、私共は、Rabphilin-3Aとその変異体のリコンビナント蛋白質をヤリイカの巨大シナプスにマイクロインジェクションすることによって、Rabphilin-3Aが神経伝達物質の放出を制御していることを明らかにした。さらに、私共は、Rabphilin-3Aとそのアンチセンスや変異体の遺伝子を、ヒト成長ホルモン(GH)の遺伝子と共に、クロマフィン細胞やPC12細胞に強制発現させることによって、Rabphilin-3AがCa^<2+>依存性のGHの分泌を制御することを明らかにした。神経伝達物質の放出にはプレシナプス内のCa^<2+>の流入が必要であるが、私共は、Rabphilin-3AのC2様領域が実際にCa^<2+>と結合することから、Rabphilin-3AがCa^<2+>センサーとなって神経伝達物質の放出を制御していると考えている。一方、私共は、すでに、Rab3Aの活性制御蛋白質としてRab GDIを見い出しているが、本年度の本研究で、新たに、Rab3Aを活性化するRab3A GETと、Rab3Aを不活化するRab3A GAPの精製に世界に先がけて成功した。このように、本年度の本研究は予想以上に進展し、当初の目的はほぼ完全に達成することができた。

In our laboratory, we analyzed Rab3A low molecular weight G protein and related proteins in the control of release of neurotransmitter substances. Rabphilin-3A, the target protein of Rab3A, was found in this study. Rabphilin-3A was found in the release of intracellular substances. Rabphilin-3A is a protein inhibitor that regulates the release of a substance. In addition, Rabphilin-3A and its allogeneic gene, growth hormone (GH) gene, growth hormone (GH) gene) gene, growth hormone (GH) gene, growth Ca^<2 +> influx into the body of a substance is necessary for the release of a substance from the body of a substance, such as Ca ^<2 +>, Rabphilin-3A and C2. In this study, Rab3A was activated, Rab3A GET and Rab3A GAP purification was successfully performed in the world. This year's study aims to achieve the above goals.

项目成果

Kuribara,H.: "Synergist activation of rat brain phospholipase D by ADP-ribosylation factor and rhoA p21, and its inhibition by clostridium botulinum C3 exoenzyme." J. Biol. Chem.270. 25667-25671 (1995)

Kuribara, H.：“ADP-核糖基化因子和 rhoA p21 对大鼠脑磷脂酶 D 的协同激活，以及肉毒杆菌 C3 外切酶的抑制作用。”

Takaishi,K.: "Translocation of activated Rho from the cytopiasm to membrane ruffling area, cell-cell adhesion sites and cleavage furrows." Oncogene. 11. 39-48 (1995)

Takaishi,K.：“活化的 Rho 从细胞质转移到膜皱褶区域、细胞间粘附位点和裂解沟。”

Fujita,Y.: "Phosphorylation of Munc-18/n-Secl/rbSec1 by protein kinase C- Its implication in regulating the interaction of Munc-18/n-Secl/rbSecl with Syntaxin." J. Biol. Chem.(in press).

Fujita,Y.：“蛋白激酶 C 磷酸化 Munc-18/n-Secl/rbSec1 - 其在调节 Munc-18/n-Secl/rbSecl 与突触蛋白相互作用中的意义。”

Matsuda,S.: "A membrane-associated GDP/GTP exchange protein specific for Rho small GTP-binding protein-partial purification and characterization from rat brain." Oncogene. (in press).

Matsuda,S.：“一种针对 Rho 小 GTP 结合蛋白的膜相关 GDP/GTP 交换蛋白 - 来自大鼠脑的部分纯化和表征。”

Regazzi,R.: "Prenylcysteine analogs mimicking the C-terminus of GTP-binding proteins stimulate exocytosis from Permeabilized HIT-T15 cells- compatrson with the effect of Rab3AL peptide." Biochim. Biophys. Acta. 1268. 269-278 (1995)

Regazzi,R.：“模仿 GTP 结合蛋白 C 末端的异戊二烯半胱氨酸类似物刺激透化 HIT-T15 细胞的胞吐作用 - 与 Rab3AL 肽的效果相比较。”