熱ショック蛋白質を標的としたがん細胞の温熱耐性克服
通过靶向热休克蛋白克服癌细胞的热耐受性
基本信息
- 批准号:10153274
- 负责人:
- 金额:$ 2.56万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
- 财政年份:1998
- 资助国家:日本
- 起止时间:1998 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
われわれが先に見い出したHsp40はバクテリアのDnaJの相同体である。細胞内ではHsp40はHsp70と挙動を共にしており、細胞内のHsp40およびHsp70の量は温熱耐性の程度とよく相関する。またHsp40とHsp70は変性蛋白質の凝集を防ぎ、ATPのエネルギーを使って元どうりに折りたたむよう機能していること、さらに細胞内においてもHsp40とHsp70は共同して熱によって変性した蛋白質の活性を回復するよう働いていることなどを報告してきた。熱ショック蛋白質(Hsp)の温熱耐性における役割を直接的に証明するためには、特定のHSpを条件的に高発現または発現抑制させる実験系が有効である。その1つにTet-on遺伝子発現系がある。まずHeLa細胞にpTet-onプラスミドを導入した。得られたTet-on HeLa細胞に、哺乳動物のDnaJ(Hsp40)相同体のうちのHSDJとHsp40のcDNAをpTREヴェクタ-に組み込んだプラスミドを導入して、doxycycline添加でHSDJおよびHsp40を高発現する細胞株を得た。HSDJとHsp40のそれぞれの発現はdoxycycline濃度依存的であり、約3倍の誘導がみられた。この条件下での細胞の温熱感受性について検討したところ、HSDJとHsp40のいずれを高発現しても温熱感受性には影響がなく、また、温熱耐性の発現も対照の細胞と比べて差はなかった。このことは、Hsp40やHSDJなとのDnaJ相同体単独では温熱感受性を変化させることはないことを示している。ただ、Hsp40を高発現した細胞に熱ショックを与えると、Hsp70やHSDJの誘導が抑制される。一方、HSDJを高発現する細胞ではこのような現象は認められなかった。このようなことから、Hsp40は細胞の熱ショック応答を負に制御していることが示唆された。
Youdaoplaceholder0 First に see に that <s:1> たHsp40 バ バ テリア テリア <s:1> DnaJ <e:1> identical body である. Intracellular で は Hsp40 は Hsp70 と 挙 dynamic を altogether に し て お り, intracellular の Hsp40 お よ び Hsp70 の quantity は warm degree of patience の と よ く phase masato す る. ま た Hsp40 と Hsp70 は の - sex protein aggregation を ぎ, ATP の エ ネ ル ギ ー を make っ て yuan ど う り に fold り た た む よ う function し て い る こ と, さ ら に intracellular に お い て も Hsp40 と Hsp70 は common し て hot に よ っ て - sex し た protein の activities を reply す る よ う 働 い て い る こ と な ど を newspaper Notice: て て た た. Hot シ ョ ッ ク protein (Hsp) の warm patience に お け る "を directly cut に prove す る た め に は, high specific の Hsp を conditions に 発 now ま た は 発 now inhibit さ せ る be が 験 department have sharper で あ る. Youdaoplaceholder0 に 1 にTet-on 伝 offspring of がある. Youdaoplaceholder0 HeLa cells にpTet-onプラス ドを ドを introduction た た. Get られたTet-on HeLa に, mammals の DnaJ (Hsp40) body same の う ち の HSDJ と Hsp40 の cDNA を pTRE ヴ ェ ク タ - に group み 込 ん だ プ ラ ス ミ ド を import し て, doxycycline, add で HSDJ お よ び Hsp40 を high 発 now す る cell lines を た. HSDJ と Hsp40 の そ れ ぞ れ の 発 now は doxycycline concentration dependent で あ り, about 3 times の induced が み ら れ た. こ の conditions で の cells の warm sensitivity に つ い て beg し 検 た と こ ろ, HSDJ と Hsp40 の い ず れ を high 発 now し て も warm sensitivity に は influence が な く, ま た, warm, patience の 発 now も polices according と の cells than べ て poor は な か っ た. こ の こ と は, Hsp40 や HSDJ な と の DnaJ same body 単 alone で は warm sensitivity を variations change さ せ る こ と は な い こ と を shown し て い る. High た だ, Hsp40 を 発 now し た cells に hot シ ョ ッ ク を and え る と, Hsp70 や HSDJ の induced が inhibit さ れ る. On one side, HSDJを shows a high occurrence of する cell で <s:1> <s:1> <s:1> ような ような phenomenon <e:1>, which indicates められな った った った. こ の よ う な こ と か ら, Hsp40 は cells の hot シ ョ ッ ク 応 を negative answer に suppression し て い る こ と が in stopping さ れ た.
项目成果
期刊论文数量(6)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Ohtsuka and Hata: "Proposal for the classification and nomenclature of mammalian Hsp40/DNAJ homologs" Cell Stress & Chaperones. (印刷中). (1999)
Ohtsuka 和 Hata:“哺乳动物 Hsp40/DNAJ 同源物的分类和命名的提案”《细胞压力与伴侣》(正在出版)。
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Suzuki et al: "Presence of molecular chaperones,heat shock cognate(Hsc)70 and heat shock proteins(Hsp)40,in the postsynaptic structure" Brain Res. 816. 99-110 (1999)
Suzuki 等人:“突触后结构中存在分子伴侣、热休克同源 (Hsc)70 和热休克蛋白 (Hsp)40”Brain Res。
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- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
大塚健三: "ストレス応答と老化・寿命" 放射線科学. 41. 199-203 (1998)
Kenzo Otsuka:“应激反应和衰老/寿命”《放射科学》41. 199-203 (1998)。
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Hata and Ohtsuka: "Characterization of HSE sequences in human Hsp40 gene : structural and promoter analysis" Biochim Biophys Acta. 1397. 43-55 (1988)
Hata 和 Ohtsuka:“人类 Hsp40 基因中 HSE 序列的表征:结构和启动子分析”Biochim Biophys Acta。
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大塚健三: "分子シャペロンによる遺伝子病治療の可能性" 蛋白質・核酸・酵素. 43. 1998-1999 (1998)
Kenzo Otsuka:“使用分子伴侣治疗遗传疾病的可能性”蛋白质、核酸和酶 43。1998-1999 (1998)。
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