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熱ショック蛋白質を標的としたがん細胞の温熱耐性克服

通过靶向热休克蛋白克服癌细胞的热耐受性

基本信息

批准号：
10153274
负责人：
大塚健三
金额：
$ 2.56万
依托单位：
Aichi Cancer Center Research Institute
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10153274/
关键词：
熱ショック蛋白質温熱耐性 Hsp70 Hsp40 HSDJ DnaJ Tet on gene expression

项目摘要

われわれが先に見い出したHsp40はバクテリアのDnaJの相同体である。細胞内ではHsp40はHsp70と挙動を共にしており、細胞内のHsp40およびHsp70の量は温熱耐性の程度とよく相関する。またHsp40とHsp70は変性蛋白質の凝集を防ぎ、ATPのエネルギーを使って元どうりに折りたたむよう機能していること、さらに細胞内においてもHsp40とHsp70は共同して熱によって変性した蛋白質の活性を回復するよう働いていることなどを報告してきた。熱ショック蛋白質(Hsp)の温熱耐性における役割を直接的に証明するためには、特定のHSpを条件的に高発現または発現抑制させる実験系が有効である。その1つにTet-on遺伝子発現系がある。まずHeLa細胞にpTet-onプラスミドを導入した。得られたTet-on HeLa細胞に、哺乳動物のDnaJ(Hsp40)相同体のうちのHSDJとHsp40のcDNAをpTREヴェクタ-に組み込んだプラスミドを導入して、doxycycline添加でHSDJおよびHsp40を高発現する細胞株を得た。HSDJとHsp40のそれぞれの発現はdoxycycline濃度依存的であり、約3倍の誘導がみられた。この条件下での細胞の温熱感受性について検討したところ、HSDJとHsp40のいずれを高発現しても温熱感受性には影響がなく、また、温熱耐性の発現も対照の細胞と比べて差はなかった。このことは、Hsp40やHSDJなとのDnaJ相同体単独では温熱感受性を変化させることはないことを示している。ただ、Hsp40を高発現した細胞に熱ショックを与えると、Hsp70やHSDJの誘導が抑制される。一方、HSDJを高発現する細胞ではこのような現象は認められなかった。このようなことから、Hsp40は細胞の熱ショック応答を負に制御していることが示唆された。

Hsp40 is the same as Hsp40. The amount of Hsp40 and Hsp70 in cells is related to the degree of thermotolerance. In addition, we report that Hsp40 and Hsp70 have both functions of preventing the aggregation of variable proteins and activating ATP molecules. In addition, in cells, Hsp40 and Hsp70 can restore the activity of variable proteins due to heat. The heat tolerance of Hsp is directly demonstrated, and the high occurrence of Hsp under certain conditions is inhibited. 1. Tet-on-Tet-on-Tet-on HeLa cells were introduced with pTet-on protein. Tet-on HeLa cells and mammalian DnaJ(Hsp40)-like HSDJ and Hsp40 cDNA were obtained by introducing pTRE into the cell line and adding doxycycline to HSDJ and Hsp40. HSDJ 40 is induced by doxycycline concentration. Under these conditions, the thermosensitivity of the cells is affected by the high temperature resistance of HSDJ and Hsp40, and the thermotolerance of the cells is affected by the low temperature resistance of the cells. Hsp40, HSDJ, DnaJ, etc. are the same body types. Hsp40 and Hsp70 are highly expressed and inhibited in cells. A party, HSDJ high development of cells, but also to recognize the phenomenon. Hsp40 is a cell phone that can be used to control cell phone calls.