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熱ショック蛋白質を標的としたがん細胞の温熱耐性克服

通过靶向热休克蛋白克服癌细胞的热耐受性

基本信息

批准号：
10153274
负责人：
大塚健三
金额：
$ 2.56万
依托单位：
Aichi Cancer Center Research Institute
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10153274/
关键词：
熱ショック蛋白質温熱耐性 Hsp70 Hsp40 HSDJ DnaJ Tet on gene expression

项目摘要

われわれが先に見い出したHsp40はバクテリアのDnaJの相同体である。細胞内ではHsp40はHsp70と挙動を共にしており、細胞内のHsp40およびHsp70の量は温熱耐性の程度とよく相関する。またHsp40とHsp70は変性蛋白質の凝集を防ぎ、ATPのエネルギーを使って元どうりに折りたたむよう機能していること、さらに細胞内においてもHsp40とHsp70は共同して熱によって変性した蛋白質の活性を回復するよう働いていることなどを報告してきた。熱ショック蛋白質(Hsp)の温熱耐性における役割を直接的に証明するためには、特定のHSpを条件的に高発現または発現抑制させる実験系が有効である。その1つにTet-on遺伝子発現系がある。まずHeLa細胞にpTet-onプラスミドを導入した。得られたTet-on HeLa細胞に、哺乳動物のDnaJ(Hsp40)相同体のうちのHSDJとHsp40のcDNAをpTREヴェクタ-に組み込んだプラスミドを導入して、doxycycline添加でHSDJおよびHsp40を高発現する細胞株を得た。HSDJとHsp40のそれぞれの発現はdoxycycline濃度依存的であり、約3倍の誘導がみられた。この条件下での細胞の温熱感受性について検討したところ、HSDJとHsp40のいずれを高発現しても温熱感受性には影響がなく、また、温熱耐性の発現も対照の細胞と比べて差はなかった。このことは、Hsp40やHSDJなとのDnaJ相同体単独では温熱感受性を変化させることはないことを示している。ただ、Hsp40を高発現した細胞に熱ショックを与えると、Hsp70やHSDJの誘導が抑制される。一方、HSDJを高発現する細胞ではこのような現象は認められなかった。このようなことから、Hsp40は細胞の熱ショック応答を負に制御していることが示唆された。

Hsp40Hsp40はバクテリアのDnaJのidentical bodyである. The amount of intracellular Hsp40 and Hsp70 is related to the amount of intracellular Hsp70 and the degree of thermotolerance.またHsp40とHsp70は変proteinのagglutinationをpreventionぎ、ATPのエネルギーを使って元どうりに fold りたたむよう function していること、さらにIntracellular Hsp40 and Hsp70 common Hsp40 and Hsp70 propertiesしたproteinのactivityをreplyするよう働いてることなどをreport してきた. Thermal resistance of Hsp protein (Hsp) is directly proven by the heat resistance test.は, the specific HSP conditions are effective in suppressing the appearance of high-risk products.その1つにTet-on 伝子発 is now a がある.まずHeLa cells were imported into した.德られたTet-on HeLa cells, mammalian DnaJ (Hsp40) homologous body, HSDJ, Hsp40, cDNA pTRE, Hsp40 -に集团み込んだプラスミドをIntroduced して, doxycycline added でHSDJ およびHsp40 を高発existing するcell strain を got た. HSDJ's Hsp40's appearance depends on the concentration of doxycycline, and its induction is about 3 times higher. Thermal sensitivity of the cells under the conditions is high The thermosensitivity of the skin is affected by the heat sensitivity of the skin, and the temperature tolerance of the skin is worse than that of the skin.このことは, Hsp40やHSDJなとのDnaJ have the same body 単多ではThermosensitivityを変化させることはないことをshowしている.ただ、Hsp40をHigh 発appearance and したcell に热ショックを and えると、Hsp70やHSDJ inducing and suppressing される. On the one hand, HSDJ is a high-rise cell and a cell phenomenon.このようなことから、Hsp40はcellの热ショック応 Answer をnegative にcontrol していることが时憆された.