温熱耐性克服のための基礎研究

克服耐热性的基础研究

• 批准号: 09255265
• 负责人: 大塚 健三
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: Aichi Cancer Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09255265/
• 关键词: 温熱耐性; Hsp40; Hsp70; DnaJ相同体; 熱ショック蛋白質

1.ヒトHsp40遺伝子の構造および発現調節機構を明らかにした。転写開始点はATG翻訳開始コドンから47bp上流にあった。プロモーター解析の結果、熱ショックによるHsp40の誘導は、8つの連続した(A/G)GAANモチーフからなる熱ショックエレメント(HSE,heat shock element)に依存することが示された。このHSEに熱ショック転写因子であるHSF(heat shock factor)1が結合することも判明した。なお、第一イントロンにもHSE様の配列が存在しているが、これは熱ショック応答には関与していないことがわかった。このようなことからHsp40は真の熱ショック蛋白質であることが証明された。2.熱ショック蛋白質(Hsp)の温熱耐性における役割を直接的に証明するためには、特定のHspを条件的に高発現または発現抑制させる実験系が有効である。その1つにTet-on遺伝子発現系がある。まずHeLa細胞にpTet-onプラスミドを導入した。得られたTet-on HeLa細胞に、哺乳動物のDnaJ(Hsp40)相同体のひとつであるHSDJcDNAをpTREヴェクターに組み込んだプラスミドを導入して、doxycycline添加でHSDJを高発現する細胞株を得た。HSDJの発現はdoxycycline濃度依存的であり、約3倍の誘導がみられた。今後このほかに、Hsp70やHsp40についても条件的に高発現または発現抑制する細胞株を単離し、これらの細胞株を用いて各Hspの温熱耐性における役割を解析していく。

1. This is the first time that the Hsp40 management system has been established, and that the operating institutions have made it clear that they are not in charge of the operation. The write start point ATG flip starts the 47bp upstream download. The results were parsed, the results were parsed, the Hsp40 wizard was analyzed, and the 8-month link link (ACPG) GAAN database was analyzed. The dependency index (HSE,heat shock element) was displayed. In this paper, we use the combination of HSE (heat shock factor) 1 and HSF (heat shock factor) 1 to determine whether a factor is correct. The first, the HSE, the other, the first, the first, the following, the first, the first Please tell me the truth, Hsp40, protein, etc. two。 Temperature tolerance (Hsp), temperature tolerance, temperature tolerance I don't know what to do. I don't know what to Tet-on. The HeLa cell does not have a pTet-on connection. The cells of mammalian animals DnaJ (Hsp40) and mammalian animals (DnaJ) were the same as those of mammalian animals. The cell lines of mammalian animals were obtained by adding the same amount of HSDJ (doxycycline). The cell lines were obtained. HSDJ shows that the degree of doxycycline dependence is about 3 times higher than that of others. In the future, the temperature tolerance of each Hsp was detected. The temperature tolerance of each Hsp was detected. The temperature tolerance of each cell line was analyzed.

项目成果

大塚健三: "ストレス応答と老化・寿命" 放射線科学. (印刷中).

Kenzo Otsuka：“压力反应和衰老/寿命”放射科学（正在出版）。

Hata,M.et al.: "Characterization of HSE sequence in human Hsp40 gene : structural and promoter analysis." Biochim.Biophys.Acta. (in press).

Hata,M.et al.：“人类 Hsp40 基因中 HSE 序列的表征：结构和启动子分析。”

Kaneko,R. et al.: "Relationship between Hsp40 synthesis and the development of thermotolerance in murine tumor in vivo." Int.J.Hyperthermia. 13. 507-516 (1997)

金子，R.

Ohtsuka K.: "Guidebook to Molecular Chaperones and Protein-Folding Catalysts." Edited by MJ Gething,Oxford University Press, 554 (1997)

Ohtsuka K.：“分子伴侣和蛋白质折叠催化剂指南”。

Michels,AA.et al.: "Hsp70 and Hsp40 chaperone activities in the cytoplasm and the nuclens of mammoclian cells" J.Biol.Chem.272. 33283-33289 (1997)

Michels，AA. 等人：“哺乳动物细胞的细胞质和核中的 Hsp70 和 Hsp40 伴侣活性”J.Biol.Chem.272。