低親和性NGF受容体の運動ニューロンにおける役割
低亲和力 NGF 受体在运动神经元中的作用
基本信息
- 批准号:06770076
- 负责人:
- 金额:$ 0.58万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
- 财政年份:1994
- 资助国家:日本
- 起止时间:1994 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本年度は、ニワトリ胚を用いた脊髄運動ニューロンの初代培養系、特に運動ニューロンのみの単離培養法の確立と、骨格筋粗抽出物中に含まれる運動ニューロン生存活性を示す物質の検討を行った。ニワトリ胚脊髄運動ニューロンは、孵卵6日目から神経細胞死がおこることがわかっており、これは標的器官である骨格筋からの運動ニューロン生存因子が受け取れなかった細胞においておこると考えられている。本研究においては運動ニューロンはすべて孵卵6日目のニワトリ胚脊髄運動ニューロンを用いた。運動ニューロン単離培養法としては、Metrizamide密度勾配遠心法、SC1,Anti-LNGFR抗体を用いたPanning法などあるが、これらのうちMetrizamide密度勾配遠心法を用いた。脊髄全体の細胞のうち運動ニューロンは約10%であると考えられているが、今回Metrizamide密度勾配遠心法を用いて検討した結果、6.7±3.7%の運動ニューロンが回収できることがわかった。また、骨格筋粗抽出物中には運動ニューロン生存活性があることがわかっている。骨格筋粗抽出物の作製を種々の緩衝液を用いて検討した結果、1%NaCl抽出、アセトン抽出、硫安抽出を連続的に行うと最も効率良く活性物質を抽出できることがわかった。さらに、この粗抽出物のゲル濾過を行うと、分子量、約40,150kDa近辺に少なくとも2つの活性のピークがあることがわかった。これらの活性物質が低親和性NGF受容体を介して作用を発現しているのか否かを検討するために、低親和性NGF受容体のアンチセンスS-オリゴDNAを用いて発現を抑えることを現在検討中であるが、まだ結果は得られていない。さらに、他の運動ニューロンに生存因子作用がある物質(CNTF,LIF,IGF-I,FGF-5など)についても、それらの受容体のアンチセンスS-オリゴDNAによる発現の阻止による効果を検討したい。
This year, the establishment of primary culture system and isolation method of special sports culture medium for embryo development, and the study of substances indicating survival activity of sports culture medium in bone marrow crude extracts were carried out. 6 days after hatching, the cells of the brain died. The target organs of the brain and the muscles of the brain died. The survival factors of the cells were detected. In this study, we found that there was no significant difference between the two groups. The Panning method for anti-LNGFR antibodies is used in the following ways: Metrizamide density matching distance method, SC1, Metrizamide density matching distance method. The results showed that 6.7±3.7% of the total cells in the spine had a movement of about 10%, and 6.7±3.7% of the cells had a movement of about 10%. In addition, the bone lattice coarse extract has the function of survival activity. The buffer solution used for the preparation of the coarse extract of the bone tendon was used to investigate the results, 1% NaCl extraction, sulfur extraction, and sulfur extraction. The crude extract has a molecular weight of about 40,150kDa. The active substance is a low affinity NGF receptor. In addition, the effects of preventing the occurrence of survival factor substances (CNTF,LIF,IGF-I, and FGF-5) in his sports activities are investigated.
项目成果
期刊论文数量(4)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Ui-Tei,K.: "Apoptosis-like DNA fragmentation in clonal cell lines from Drosophila larval CNS." Neurosci.Res.Suppl.19. S88-S88 (1994)
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