シェーグレン症候群の特異的制御へのアプローチ(自己反応性T細胞と自己抗原の解析)

干燥综合征的特异性控制方法（自身反应性 T 细胞和自身抗原分析）

• 批准号: 10167223
• 负责人: 住田 孝之
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10167223/
• 关键词: シェーグレン症候群; T細胞レセプター; 自己反応性T細胞; 自己抗原T細胞エピトープ; アナログペプチド

シェーグレン症候群(SS)の口唇唾液腺には、T細胞を中心とした著明な細胞浸潤が認められ自己免疫発症に重要な役割を果している。浸潤T細胞のT細胞レセプター(TCR)解析から、それらが抗原刺激により誘導されていることが判明してきた。本研究では、唾液腺に浸潤したT細胞を認識する対応抗原を明らかにし、アナログペプチドを用いた特異的制御を目的とした。方法として、1)唾液腺より樹立したT細胞株を用いて細胞増殖反応で抗原を解析する方法、2)TCRを指標としてSSCP法で抗原を選定する方法、3)唾液腺に特有なT細胞のCDR3領域をコードする蛋白をプローブとして唾液腺のcDNAライブラリー由来蛋白をスクリーニングするWest-Western法、4)TCRα/β鎖を発現したトランスフェクタントを用いて抗原を決定する方法を行った。その結果、1)唾液腺特異的自己抗原としてαアミラーゼが機能しており、そのEKMSYLKNWGEG(AA287-298)とNPFRPWWERYQWPV(AA68-80)がT細胞エピトープであることが判明した。2)臓器非特異的な自己抗原としてRo/SS-A52kD蛋白(DEREQLRIFG,AA203-212)、熱ショック蛋白(WVNMLRRGI)とTCRBV6蛋白(WAEILRIGRV)それ自身が検出された。現在、自己反応性T細胞をアンジーに誘導し不活化するアナログベプチドをin vitroで選別中である。将来、抗原のアナログペプチドあるいは調節性ペプチドそのものをワクチネーションすることにより、SSの特異的制御が期待される。

The oral salivary glands in patients with SS2 syndrome (SS) are the center of T cell infiltration, which is an important part of immune response. Infiltrating T cells and T cell receptor (TCR) analysis and identification The purpose of this study is to identify and control the specific role of salivary gland infiltration in T cell recognition. Methods: 1) T cell lines from salivary glands were established and used for antigen analysis in cell proliferation; 2)TCR index and SSCP method were used for antigen selection; 3) Western method was used for protein identification in CDR3 domain of T cells specific to salivary glands; 4)TCRα/β lock detection and detection method 1) Salivary gland specific self antigen 2)Non-specific self antigens such as Ro/SS-A52kD protein (DEREQLRIFG, AA203 -212), WVNMLRGI protein and TCRBV6 protein (WAEILRIGRV) were detected. Now, our own anti-T cells are induced and inactivated in vitro selection. In the future, antigen selection and selection will be regulated by regulatory factors, and SS specific control will be expected.

项目成果

Saitoh, I., et al.: "IL-10 transgenic mice as a model for Sjogren's syndrome." J.Immunol.(in press). (1999)

Saitoh, I., et al.：“IL-10 转基因小鼠作为干燥综合征的模型。”

Fujisawa K., et al.: "Evidence for autoantigens of env/tax proteins in HTLV-1 tax transgenic mice." Arthritis Rheum.41. 101-109 (1998)

Fujisawa K. 等人：“HTLV-1 Tax 转基因小鼠中 env/tax 蛋白自身抗原的证据。”

Okamoto, K., et al.: "Potential induction of apoptosis in rheumatoid synovium by Fas ligand gene transfer." Gene Therapy. 5. 331-338 (1998)

Okamoto, K. 等人：“Fas 配体基因转移可能诱导类风湿滑膜细胞凋亡。”

Maeda, T., et al.: "Deletion of signaling molecule gene resembling the cytoplasmic domain of lgβ in autoimmune prone mice." Int.Immunol.10. 815-821 (1998)

Maeda, T., et al.：“在自身免疫易感小鼠中删除重新组装 lgβ 细胞质结构域的信号分子基因。”Int.Immunol.10 (1998)。