上皮誘導における細胞接着およびシグナル伝達関連因子カテニンの役割

细胞粘附和信号转导相关因子连环蛋白在上皮诱导中的作用

• 批准号: 10171215
• 负责人: 永渕 昭良
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10171215/
• 关键词: 上皮; 細胞接着; αカテニン; カドヘリン; サイトケラチン18; オクルディン; AFP; ターゲッティング

本研究では昨年度作成したαカテニン欠損F9細胞を用いてαカテニンが上皮分化、上皮の形態形成及び細胞増殖において果たす役割の解析を行った。昨年度αカテニシ欠損F9細胞は形態的には上皮組織を構築できないことを報告したが、本年度はまず分化マーカーを用いてαカテニン欠損F9細胞の上皮細胞への分化を検討した。αカテニン欠損細胞の細胞集塊においても分化誘導後数日で上皮細胞の分化マーカーであるサイトケラチン18やオクルディン、AFPなどの発現が観察された。結果としてαカテニン欠損細胞においても細胞は細胞集塊の最外層という特定の場所で、特定の時期に上皮細胞が分化すること、αカテニンは上皮細胞の分化ではなく形態形成において重要な役割を果たしていることが示された。一方、αカテニン欠損細胞の細胞集塊を上皮誘導条件下におくと多くの細胞が細胞集塊から離脱し、その内の一部の細胞が典型的な印鑑細胞の形態を示すことが観察された。これらの細胞は上皮分化マーカーを発現し、さらに生体内での印鑑細胞癌と同様PAS染色で陽性を示した。結果としてαカテニンの機能不全は癌細胞が分散型の形態を示す原因になるだけではなく、印鑑細胞癌の原因にもなっていることが強く示唆された。最後にαカテニン欠損F9細胞とそこにαカテニンを再発現させた細胞の増殖能について検討した。通常の単層培養条件下でこの2種類の細胞の増殖能に大きな差はみられなかったが、細胞集塊を上皮分化誘導条件下におくとαカテニンを発現している細胞の細胞集塊はαカテニシ欠損細胞の細胞集塊に比べて有為に成長が抑制されることが分かった。結果として上皮誘導条件下においてはαカテニンは顕著な増殖抑制活性を示すことが示唆された。

In this study, we established a new method for analyzing epithelial differentiation, epithelial morphogenesis, and cell proliferation in F9 cells. This year's study on the differentiation of F9 cells was carried out in response to the morphological changes in F9 cells. A few days after differentiation induction, differentiation of epithelial cells was observed in the cell aggregates of α-damaged cells. The results showed that the differentiation of epithelial cells in the outermost layer of cell mass was important for morphogenesis. The morphology of cell aggregates of defective cells was observed under epithelial induction conditions. The cell differentiation was detected and the PAS staining was positive. The results showed that the function of α-ray was incomplete, and the cause of cancer cell dispersion was strong. Finally, the cell growth potential of F9 cells was rediscovered. Under normal single-layer culture conditions, the proliferation of these two types of cells is greatly inhibited. Under epithelial differentiation induction conditions, cell aggregates of these two types of cells are inhibited. The results showed that under epithelial induction conditions, the growth inhibition activity was decreased.

项目成果

Maeno, Y., Moroi, S., Nagashima, H., Noda, T., Shiozaki, H., Monden, M., Tsukita, Sh., and Nagafuchi, A: "alpha catenin-deficient F9 cells differentiate into signet ring cells" Am.J.Pathol.(in press). (1999)

Maeno, Y.、Moroi, S.、Nagashima, H.、Noda, T.、Shiozaki, H.、Monden, M.、Tsukita, Sh. 和 Nagafuchi, A：“α 连环蛋白缺陷的 F9 细胞分化为印章

Sako, Y., Nagafuchi, A., Tsukita, Sh., Takeichi, M.and Kusumi, A.: "Cytoplasmic regulation of the movement of E-cadherin on the free cell surface as studied by optical tweezers and single particle tracking: corralling and tethering by the membrane skeleto

Sako, Y.、Nagafuchi, A.、Tsukita, Sh.、Takeichi, M. 和 Kusumi, A.：“通过光镊和单粒子跟踪研究了游离细胞表面 E-钙粘蛋白运动的细胞质调节：

Imamura,Y.,Itoh,M.,Maeno.Y.,Tsukita,Sh.and Nagafuchi.A.: "Functional domains of alpha catenin required for the strong state of cadherin based cell adhesion" J.Cell.Biol.(in press). (1999)

Imamura,Y.、Itoh,M.、Maeno.Y.、Tsukita,Sh. 和 Nagafuchi.A.：“基于钙粘蛋白的细胞粘附的强状态所需的 α ​​连环蛋白的功能域”J.Cell.Biol.（in

M.Watabe-Uchida,Uchida.N.,Imamura.Y.,Nagafuchi.A.,et.al.: "alpha-catenin-vinculin interaction functions to organize the apical junctional complex in epithelial cells." J.Cell.Biol.142. 847-857 (1998)

M.Watabe-Uchida、Uchida.N.、Imamura.Y.、Nagafuchi.A. 等人：“α-连环蛋白-纽蛋白相互作用可组织上皮细胞中的顶端连接复合体。”