マウス初期胚における母性RNA情報の伝達と消長

早期小鼠胚胎中母体RNA信息的传递和命运

• 批准号: 10174226
• 负责人: 木村 穣
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Tokai University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10174226/
• 关键词: 遺伝子発現; マウス受精卵; 母性RNA; poly A; CPE; Cytoplasmic Polyadenylation; Polyadenylation; RNA鎖伸長

本研究では、実施計画に従い以下の成果を得た。(1) 鎖長の伸長・短縮の実体を塩基配列レベルで明らかにする新たな方法として、RNA鎖の3'末端に合成オリゴリボヌクレオチドをT4RNAリガーゼにより直接付加した後、逆転写反応とPCRにより、SSEC-DRNAの3'領域を増幅し、この増幅産物を直接に塩基配列決定するという方法に挑戦した。これにより、SSEC-DRNAの3'末端領域に約370個のアデニンに相当するピークが得られた。母性型SSEC-DmRNAには元来100ヌクレオチド程度のpoly(A)鎖がついており、これが受精後さらに300ヌクレオチド程度伸長されることにより鎖長が増大しているものと考えられた。しかし、この300ヌクレオチド内には他の塩基が挿入されている可能性もあり、今後明らかにするべき課題と考える。(2) 接合子型mRNAの合成をα-Amanitinによって阻害する、あるいは受精後のDNA合成をAphidico1inにより阻害した実験では、薬剤を添加しない場合と同様に母性型SSEC-DmRNAが1-2細胞期に伸長した後、短縮し、その後分解されることを観察したが、シクロへキシミドを添加した場合は、伸長が直ちに停止し、このRNAサイズの変化はタンパク質の合成が必要であることが判明した。未受精卵でも受精の刺激なしに基本的に同様の変化が見られることから、今後このRNA長変化に関わるcis elementとtrans acting factorを明らかにするとともに、その生物学的意義を明らかにしていきたい。

The following results were obtained from this study. (1)A new method for determining the base alignment of the RNA lock 3'end is proposed, which includes direct addition, reverse transcription, PCR, amplification of the SSEC-DRNA 3' domain, and direct determination of base alignment of the amplified product. The 3'terminal region of SSEC-DRNA contains approximately 370 amino acids corresponding to the amino acid sequence. The maternal SSEC-D mRNA is expressed in a poly(A) chain that extends from 100 to 300 degrees after fertilization. In the future, there will be a study on the possibility of further research into the future. (2)The synthesis of zygotic mRNA is inhibited by α-Amanitin, and the synthesis of DNA after fertilization is inhibited by Aphidico1. In the same case, the maternal SSEC-D mRNA is elongated, shortened, and decomposed at 1-2 cell stages. It is necessary to identify the DNA sequence of RNA. Unfertilized eggs are stimulated by basic changes in their RNA length, which are related to cis element and trans acting factor.

项目成果

Shiina,T.,Kimura,M.et al.: "Physical mapping between the S and IILA-E genes in the human MIIC class region;construction of a BAC,PAC and cosmid contig." Immunogenetics. 48. 402-407 (1998)

Shiina,T.,Kimura,M.等人：“人 MIIC 类区域中 S 和 IILA-E 基因之间的物理作图；BAC、PAC 和粘粒重叠群的构建。”

Chen,L.,Kimura,M.et al.: "Molecular cloning of a leucine zipper motif-containing novel cDNA specifically expressed in adult mouse t4estie." DNA Sequence. 9. 101-108 (1998)

Chen,L.,Kimura,M.等人：“在成年小鼠 t4estie 中特异性表达的含有亮氨酸拉链基序的新型 cDNA 的分子克隆。”

Kimura,M.,Sato,M.et al.: "Overexpression of a Minor Component of Myclin Basic Protein Isoform(17.2kDa)can Restore Myclinogencsis in Transgenic Shiverer Mice." Brain Research. 785. 245-252 (1998)

Kimura,M.,Sato,M.等人：“Myclin 碱性蛋白异构体 (17.2kDa) 的次要成分的过度表达可以恢复转基因 Shiverer 小鼠的 Myclinogencsis。”

Miyado,K.,Kimura,M.et al.: "Differential Expression of mRNAs for M31 and M32,Murine IIomologues of Drosophilla IIeterochromatin Protein 1(HP1),During Murine Embryogenesis." Biochem.and Molec.Biol.Int.44. 1051-1058 (1998)

Miyado,K.、Kimura,M.等人：“果蝇 II 异染色质蛋白 1 (HP1) 的小鼠 II 同源物 M31 和 M32 mRNA 的差异表达，在小鼠胚胎发生过程中。”

Taniguchi,Y.,Kimura,M.et al.: "Nucleotide Sequence of the Ring3 Gene in the ClassII Region of the Mouse MHC and Its Abumdant Expression in Testicular Germ Cells." Genomics. 51. 114-123 (1998)

Taniguchi,Y.,Kimura,M.等人：“小鼠 MHC II 类区域中 Ring3 基因的核苷酸序列及其在睾丸生殖细胞中的丰富表达”。